徐娜，张雪梅，王钦富

    CpG 基序(CpG motifs)是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)核苷酸核心的寡聚脱氧核苷酸(ODN)序列，又称为免疫刺激序列，一般为6个寡聚核苷酸。1995年，Krieg等[1]研究发现非甲基化的CpG 二寡聚核苷酸是病原体 DNA 免疫刺激活性的结构基础，自此，对 CpG 基序的各种研究得以展开，包括 CpG 基序免疫刺激机制、CpG 基序个数及结构对免疫刺激活性影响、CpG 寡聚脱氧核苷酸作为佐剂使用等。含有非甲基化 CpG 二核苷酸的寡聚脱氧核苷酸作为一种免疫增强剂，在体内和体外均表现免疫刺激作用，可以引起先天性免疫反应。CpG 在体内能引起明显且多样化的免疫作用，包括树突状细胞和NK 细胞增殖、巨噬细胞和B 细胞的促炎症细胞因子表达、Th1/Th2免疫应答的调控、血循环系统中的补体作用[2]。CpG 寡聚脱氧核苷酸序列作为佐剂时可明显延长机体免疫记忆的时间，在较低浓度抗原刺激时 B 细胞就能反应，产生更高纯度的抗体[3-4]。

    作为疫苗佐剂，CpG 寡聚脱氧核苷酸在机体内的传递速率和降解速度是影响其效力的关键问题。而体型较大的动物需要较高的CpG 寡聚脱氧核苷酸注射量才能引起有效反应，一般要求 10 mg 以上，致使 CpG 在动物疫苗实际应用中成本较高。因此，研究增强 CpG 佐剂作用，减少CpG 应用剂量，会增加 CpG 寡聚脱氧核苷酸的应用与普及，在疾病防治中具有重要的实际意义。本文就近年有关提高 CpG 免疫刺激作用的新途径进行综述。

    1 与传统佐剂苦杏仁酶、铝佐剂组合

    诱导 Th1 型免疫反应的CpG 与诱导 Th2 型免疫反应的其他种类佐剂(如皂苷 A 或苦杏仁酶)的组合能导致Th1/Th2 免疫反应的相对平衡，这种作用在诸如鼠、兔、猪、牛等动物试验中得到证明。CpG 与苦杏仁酶联合制剂能明显增加血清中和抗体。事实上，即使很少量的CpG(250 μg)与苦杏仁酶混合引起的作用也比单独使用较大量 CpG(25 mg)强很多[5]。在绵羊体内 CpG是 2′5′A 合成酶的诱导剂。新生羊肺注入 CpG 与苦杏仁酶制剂，可引起 2′5′A合成酶分泌量达到最高，IFN-α、IFN-γ 分泌也有所增加，而且 CpG 用量减少 80%[6]，在猪体内的试验表明 10% 苦杏仁酶和CpG 混合物引起的免疫反应与30% 苦杏仁酶和CpG 混合物引起的免疫反应效果相同[7]，在小鼠、羊的动物实验中，两种物质混合后IgG1/IgG2a 降低，IFN-γ分泌增加，小鼠脾脏 IL-4 分泌减少[6] ......