彭瑶，张文谨，连增林，靳冉，李晋生，孟坤

    子宫内膜癌是常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康。目前治疗子宫内膜癌的方法主要有手术治疗、放射治疗、化学抗癌药物及激素治疗等[1]。中药类抗癌药物具有有效、低毒的优势，作为治疗肿瘤的替代或辅助疗法日益受到人们的关注。

    阿可拉定(SNG-162)是从中药淫羊藿中分离提取得到的单一有效成分淫羊藿黄素，以近期发现的新型雌激素受体亚型 ER-α36 为作用靶点，临床适应证为乳腺癌、子宫内膜癌以及雌激素受体亚型ER-α36 阳性的相关肿瘤。本实验主要观察阿可拉定及与顺铂联合用药对子宫内膜癌细胞的抗肿瘤作用，研究其对 ER-α36 及ER-α66 表达的影响，探讨其可能的作用机制，为子宫内膜癌患者的临床治疗提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物及试剂 阿可拉定由北京珅奥基医药科技有限公司提供，黄色粉末状，用 DMSO 配制成浓度为4 mmol/L的储存液，4 ℃ 避光保存，使用前用含 10% 胎牛血清的DMEM 培养液稀释到相应浓度，且预实验结果表明：储存液稀释到相应浓度后，细胞培养液中 DMSO 所占比例小于1%，对细胞生长无影响(同无 DMSO 培养液相比较，P >0.05)。顺铂(DDP)购自中日友好医院；胎牛血清(FBS)、DMEM(高糖)培养基粉末、噻唑蓝(MTT)、胰蛋白酶(0.25%)为Gibco公司产品；二甲基亚砜(DMSO)为北京化工厂产品；TRIzol 为美国 Invitrogen公司产品；逆转录试剂盒为美国 Promega公司产品；PCR 引物、100 bp DNA ladder、Taq 酶、dNTPs、PCR 缓冲液、PCR 染料均在北京赛百胜基因技术有限公司合成和购置。

    1.1.2 细胞株 人子宫内膜癌 HEC-1B 细胞购自中科院上海生命科学研究院细胞资源中心。

    1.1.3 仪器 凝胶成像仪购自美国 Bio-Rad公司；EDC-810 基因扩增仪购自北京东胜创新生物科技有限公司；HERA cell 150 恒温 CO2培养箱购自美国 Thermo公司；倒置显微镜购自日本 Olympus公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 人子宫内膜癌 HEC-1B 细胞用含 10% FBS的DMEM 培养液 ......