陈明学，郭维民，沈师，王振勇，王泽昊，张增增，李旭，张学亮，荆晓光，刘舒云，郝立波，韩纲，郭全义

    半月板细胞外基质-海藻酸水凝胶的制备及其对半月板细胞的影响

    陈明学，郭维民，沈师，王振勇，王泽昊，张增增，李旭，张学亮，荆晓光，刘舒云，郝立波，韩纲，郭全义

    目的制备脱细胞半月板细胞外基质-海藻酸(AMECM-Alg)水凝胶，并研究 AMECM-Alg 水凝胶对半月板细胞增殖、再分化的影响。

    方法联合物理化学方法制备 AMECM，以 AMECM 和海藻酸为原料制备 5 种不同浓度的 AMECM-Alg 水凝胶(0%、0.5%、1%、2% 和 4%)；复合 P3代半月板细胞，通过细胞死活染色、CCK8 实验、DNA 定量评估水凝胶促进细胞增殖的能力，通过胶原、糖胺多糖定量，RT-PCR 评估水凝胶促进细胞再分化的能力。结果死活细胞染色、CCK8 实验和 DNA 定量实验表明AMECM-Alg 水凝胶均能促进细胞的增殖，其中以 2% 浓度组作用最强；胶原和糖胺多糖定量结果表明 AMECM-Alg水凝胶均能促进半月板细胞分泌细胞外基质，其中 2% 浓度组明显优于其他组。RT-PCR 结果显示半月板细胞在 2%浓度组水凝胶中 collagen Ia2、collagen IIa1、SOX9 和aggrecan 基因表达量明显高于其他组。结论AMECM-Alg 水凝胶具有良好的细胞相容性，既能促进细胞增殖，又能促进细胞再分化，其中以 2% 浓度组的作用最强，在未来组织工程半月板生物材料研究方面具有很好的应用前景。

    半月板，胫骨； 组织工程； 水凝胶； 细胞外基质； 海藻酸

    由于运动外伤、关节疾病、衰老等原因，半月板损伤在临床上相当常见，半月板损伤会引起患者膝关节疼痛、肿胀，从而降低患者的生存能力，影响患者的身心健康[1]。目前针对半月板损伤的治疗手段主要是部分或全部半月板切除[2]，半月板切除虽然能获得短期的症状缓解和功能恢复，但是最终都不可避免地会导致骨性关节炎[3-4]。由于半月板结构特殊，功能复杂，损伤半月板的再生与修复目前仍是充满挑战性的科学难题。组织工程技术的出现为半月板的再生与修复提供了新的思路。组织工程的关键要素主要包括种子细胞、支架材料和生物因子[5-6]。由于半月板细胞是成体细胞，体外扩增过程中不仅增殖速度缓慢，而且会逐渐丧失细胞表型，主要原因是平面培养不能很好地模拟细胞生长的微环境[7]。为此本实验创新性地提出了通过制备脱细胞半月板细胞外基质-海藻酸(AMECM-Alg)水凝胶的设想，试图研究出一种能很好地模拟细胞生长微环境的生物材料 ......