孙博，林嘉杰，王树松，孙绍光

    ·综述·

    siRNA和microRNA用于抗病毒的研究进展

    孙博，林嘉杰，王树松，孙绍光

    050017 石家庄，河北医科大学研究生学院(孙博、林嘉杰、王树松、孙绍光)；050051 石家庄，河北省计划生育科学技术研究院(孙博、王树松)

    1999 年，Hamilton 和 Baulcombe[1]首次提出了小干扰 RNA(small interfering RNA，siRNA)的概念，发现植物中自然发生的 siRNA 能引起转录后的基因沉默现象。2001 年，Elbashir 等[2]发现合成的 siRNA 能够引起不同哺乳动物细胞系的基因沉默现象。这一发现表明，通过合成 siRNA 能够引发可控的基因沉默现象，甚至有可能作为基因特异性治疗剂。近年来，通过 siRNA 来沉默病毒复制关键基因的表达，已成为抗病毒感染研究的热点。1993 年，Lee 等[3]在秀丽隐杆线虫中首次发现了微 RNA(microRNA，miRNA)。该线虫中 lin-4 基因的两种小转录物(分别为 22 和 61 nt)能与 lin-14 mRNA 的 3'-UTR 发生碱基互补配对，从而抑制 lin-14 mRNA 的翻译。2000 年，Pasquinelli 等[4]发现了第二种 miRNA——let-7，同时发现 let-7 在不同物种中高度保守。这促使大量研究人员投入到 miRNA 的研究中。随着研究的不断深入，发现 miRNA 水平的紊乱与多种疾病的发生有关[5-6]。需要特别指出的是，miRNA 在病毒感染过程中发挥重要作用。有研究表明，miRNA 既能抑制病毒在宿主细胞内的复制，也能促进病毒在宿主细胞内的复制[7-8]。这说明 miRNA 模拟物和 miRNA 拮抗剂有望成为抗病毒药物的研发热点。因此，探究参与病毒感染过程中的 siRNA 和 miRNA，对病毒感染的治疗具有重大意义。

    1 siRNA 和 miRNA 的生成

    siRNA 是一种长度为 21 ~ 23 bp 的小片段双链 RNA(double stranded RNA，dsRNA)，主要引起 RNAi 现象。siRNA 诱导 RNAi 的基本过程如下[9-11]：首先，外源性 dsRNA 通过 Dicer 酶和 TAR-RNA 结合蛋白(TAR-RNA binding protein，TRBP)的剪切，形成 21 ~ 23 bp 的 siRNA。然后，siRNA 与 AGO 复合体结合形成 RNA 诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex ......