梁景乐，张善飞，李子勇，李云飞，陈宁

    那西肽是活跃链霉菌(streptomyces actuosus)产生的次级代谢产物，与硫链丝菌素(thiostrepton)、盐屋霉素(siomycin)及硫肽霉素(thiopeptin)等抗生素结构相似，均属于含硫多肽类抗生素[1]。那西肽最先于 20 世纪 60年代发现，现在作为一种畜禽专用的抗生素在多个国家允许使用。尽管我国于 2019年颁布文件，禁止该抗生素长期添加于饲料中用于畜禽促生长，但是由于该类抗生素结构的特异性，对这类抗生素的工艺研究工作仍是方兴未艾[2]。

    目前工业化生产的那西肽菌株主要通过诱变育种获得[3]。李依韦等[4]利用紫外诱变与化学诱变得到产量提高16.65% 的高产菌株。秦艳飞等[5]通过紫外-氯化锂诱变并结合氨基酸抗性筛选得到高产菌株，产量提高 72.5%。公维亮等[6]通过等离子(ARTP)诱变与双亲灭活原生质体融合技术选育出效价提高 15% 的那西肽高产菌株。随着生物技术的发展成熟，基因工程技术也被应用于菌种选育，但由于其对技术和设备要求比较高，过程复杂，费用较大，且成功率较低，诱变育种仍是工业菌种选育最为有效的手段[7]。本文采用紫外诱变和链霉素抗性筛选对本菌种中心保存的一株工业化生产用那西肽生产菌进行处理，获得了那西肽产量明显提高的正突变的菌株，并对这些菌株的发酵能力和稳定性进行了研究，为那西肽菌种的工业化生产能力的提高奠定了基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 那西肽产生菌：活跃链霉菌streptomyces actuosusSL201905010，由山东胜利生物工程有限公司菌种中心保存于-80 ℃ 冰箱甘油管中。

    1.1.2 主要试剂和仪器 酵母浸出粉购自国药集团有限公司；硫酸链霉素购自美国 Sigma 公司。紫外线诱变箱购自济南杰康净化设备厂；封闭式摇床和培养箱均购自上海世平实验设备有限公司；低速离心机购自湘仪离心机仪器有限公司；e2695 高效液相色谱分析仪购自美国 Waters 公司 ......