詹芸，李瑞，蒋建东，韩燕星

    ·论著·

    绿原酸通过下调Notch1的表达抑制食管癌细胞的克隆形成和侵袭转移

    詹芸，李瑞，蒋建东，韩燕星

    100050 北京，中国医学科学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室

    考察 Notch1 在绿原酸(CGA)抑制食管癌过程中的作用及机制。采用表达谱芯片检测食管癌小鼠食管组织中的差异基因表达，并用免疫组化(IHC)染色方法进行验证；用 CGA 对不同的食管癌细胞系进行处理，通过 Western blot 检测不同细胞中 Notch1 的表达变化情况。采用 RNAi 技术敲降食管癌细胞中 Notch1 的表达，再加入 CGA 处理，利用克隆形成实验和 Transwell 实验检测食管癌细胞的克隆形成能力和侵袭转移能力的变化情况。通过表达谱芯片结果发现 Notch1 在接受 CGA 治疗的食管癌小鼠食管组织内的表达下降，并且 IHC 染色结果证实这一变化。Western blot 结果显示，CGA 能够抑制不同食管癌细胞中 Notch1 的表达，并且这种抑制作用会随着 CGA 处理浓度的增加而逐渐增强。采用 RNAi 技术敲降食管癌细胞中的 Notch1 后加入 CGA 进行克隆形成实验和 Transwell 实验，结果均表明，在正常表达 Notch1 的食管癌细胞中，经过 CGA 处理的细胞所形成的克隆团数目与发生侵袭转移的细胞数目远远低于对照组，而敲降 Notch1 之后，两组细胞所形成的克隆团数和发生侵袭转移的细胞数量未有明显的差异。Notch1 是 CGA 的作用靶点之一，CGA 通过作用于 Notch1 进而抑制食管癌细胞的克隆形成和侵袭转移。

    绿原酸； Notch1； 食管癌； 克隆形成； 侵袭

    食管癌是常见的消化道肿瘤之一，其发病率与死亡率分别居于全部恶性肿瘤发病率与死亡率的第九位和第六位[1]。我国是食管癌的高发地区，其死亡率仅次于肺癌、胃癌及肝癌[2]。Notch1 是一种高度保守的细胞跨膜蛋白，参与调节多种重要的生物学进程，例如细胞增殖、凋亡、分化等[3]。研究表明 Notch1 的异常广泛存在于多种肿瘤中[4]。在食管癌中，Notch1 常常出现表达或者功能异常，是食管癌发生发展过程中的关键因子之一[5]。

    绿原酸(chlorogenic acid，CGA)是一种水溶性酚类化合物，在多种植物中存在，具有广泛的生物学活性，包括抗肿瘤活性，在临床肿瘤治疗中展现出了良好的治疗效果。本课题组前期工作已经证实 CGA 能够有效抑制食管癌细胞的增殖及侵袭转移[6] ......