李方强，郑光辉，张艳，张国军

    作者单位：100070 北京，首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心/国家药监局体外诊断试剂质量控制重点实验室/北京市免疫试剂临床工程技术研究中心

    中枢神经系统感染是一类由于病原微生物侵犯中枢神经系统的实质、被膜以及血管而引起的急慢性炎症，是院内常见、严重的并发症之一，可导致严重的后遗症，甚至危及患者的生命[1-2]。传统病原学诊断方法需要将阳性脑脊液培养液转种到固体培养基上，过夜孵育以得到足够的单个菌落来进行细菌鉴定和药敏试验，但整个过程耗时漫长。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight-mass spectrometer，MALDI-TOF MS)是近些年发展起来的一种细菌鉴定技术，可快速完成细菌鉴定[3]。在此基础上，研究者们还尝试了很多将鉴定过程进一步提速的方案，如直接对阳性培养物进行洗涤离心、过滤等，富集蛋白以直接质谱鉴定[4]。但这些方案往往过程较为复杂，或容易产生额外成本。本研究探讨了利用脑脊液阳性培养液转种后的短期培养物，直接质谱鉴定，并开展快速药敏试验的方案，与常规质谱鉴定加常规药敏试验的结果比较，验证该方案的可行性，以构建新的检测流程。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 标本来源 收集 2018年11月–2019年10月北京天坛医院脑脊液培养阳性样本 216 例，培养液经革兰染色后证实为单一细菌感染，仅保留患者第一次脑脊液培养阳性样本。质控菌株为大肠埃希菌 ATCC 8739、金黄色葡萄球菌 ATCC 29213、大肠埃希菌 ATCC 25922。

    1.1.2 仪器与试剂 Bact/Alert 3D 培养仪、VITEK-MS 质谱分析仪、VITEK-2 Compact60 鉴定药敏仪、Bact/Alert PF 儿童血培养瓶、基质液CHCA、GN09 药敏卡、GP67 药敏卡均购自法国生物梅里埃公司；哥伦比亚血琼脂平板购自美国赛默飞世尔公司 ......