形态学技术在经方研究中的应用
切片,1常用技术概要,2应用体会
王 谦 李姝玉 许 红 高誉珊 张淑静 李宇航(北京中医药大学基础医学院,北京,100029)
形态学技术在经方研究中的应用
王 谦 李姝玉 许 红 高誉珊 张淑静 李宇航
(北京中医药大学基础医学院,北京,100029)
文章介绍了实验研究常用的医学形态学技术如石蜡切片、冰冻切片、电镜超薄切片、组织化学和细胞培养等,因具有客观、直观等技术优势,在现代医学教学和科研中占有重要地位。将形态学技术引入到经方现代研究中,对于阐释经方组方原理、探索经方治疗常见病、疑难病的机制,亦同样具有重要意义。
形态学;实验技术;经方
形态学是研究动、植物形态的科学,在生物学中占有重要地位。医学形态学作为形态学的一个分支,是医学教学和研究中的重要组成部分。医学形态学的研究方法从最早的肉眼观察,到后来各种显微镜技术的使用,进展到微观领域,其研究结果具有客观、直观的特点,因而在多个研究领域得到了广泛应用。
“经方”一词最早见《汉书·七略·方技略》,原指治疗疾病的经验之方,目前中医界则专指《伤寒论》《金匮要略》中所载的方剂。以其立法严谨,取效卓著,而被誉为“医方之祖”,现代诠释为“经典方剂”。经过多年的临床实践证实,经方在治疗多种疾病中均有较好的疗效,因此对于经方的研究始终长盛不衰。在研究中使用现代技术方法,使得经方的研究不断现代化,对经方的现代研究亦具有很好的促进作用。
1 常用技术概要
在实验研究中常用的形态学研究技术有各种切片的制作,包括石蜡切片、冰冻切片、电镜超薄切片;细胞培养技术和组织化学技术等。
1.1 石蜡切片
1.1.1 技术特点 石蜡切片在常规制片技术中应用最为广泛。石蜡切片经过染色后可观察细胞组织的形态结构,这一技术已广泛地应用于其他许多学科领域的研究中。石蜡切片技术还可以和免疫技术结合,如常用的免疫组织化学技术。利用抗原与抗体的特异性结合原理,检测组织切片中细胞组织的多肽及蛋白质等大分子物质的定性和定位观察研究。
石蜡切片必须经过染色后才能进行观察,最常用的染色方法是HE染色方法。经HE染色后,细胞核被苏木精染成紫蓝色,多数细胞质及非细胞成分被伊红染成粉红色。为了显示某些特定的结构或成分,需要选择专门显示这些成分的染色方法进行染色,如胶原纤维染色(Masson)和糖原染色(PAS)等。实际工作中可根据实验目的的不同,选择合适的染色方法(图1)。
1.1.2 应用举例 我们团队在复制慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Diseases ......
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