程 敏 许 玮 刘 磊 谢伟东 徐宏喜 许乃寒*

    (1 清华大学生命科学学院，北京，100084； 2 清华大学深圳研究生院生命与健康重点实验室，深圳，518055；3 上海中医药大学中药学院，上海，201203； 4 中药创新药物研发上海高校工程研究中心，上海，201203)

    天然产物oblongifolin C诱导ROS和线粒体降解

    程敏1许玮1刘磊1谢伟东2徐宏喜3,4许乃寒2*

    (1 清华大学生命科学学院，北京，100084； 2 清华大学深圳研究生院生命与健康重点实验室，深圳，518055；3 上海中医药大学中药学院，上海，201203； 4 中药创新药物研发上海高校工程研究中心，上海，201203)

    目的：探讨藤黄属植物中提取的多环多异戊烯基间苯三酚类天然小分子化合物oblongifolin C(OC)对细胞线粒体功能和细胞凋亡的影响。方法：以野生型和促凋亡基因bax/bak双敲除的小鼠胚胎成纤维细胞MEF和人结肠癌细胞HCT116为研究模型，通过流式细胞术，共聚焦显微术和蛋白质免疫印迹法检测OC对ROS，线粒体功能和细胞凋亡的影响。结果：OC能够诱导细胞产生ROS，破坏线粒体结构，降低线粒体膜电位，最终造成线粒体降解和细胞内ATP耗竭，使细胞走向凋亡。结论：OC能通过多条途径诱导细胞凋亡，是一种极有抗癌潜力的天然化合物。

    藤黄；Oblongifolin C；ROS；线粒体；凋亡

    Oblongifolin C(OC)是藤黄属植物中提取的一类多环多异戊烯基间苯三酚化合物，具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力[6]。研究发现OC是一种新型的自噬抑制剂，能够抑制自噬溶酶体的形成和溶酶体组织蛋白酶Cathepsin B和Cathepsin D的表达和活性，从而降低肿瘤细胞对饥饿的耐受力[7]。此外，OC还能引起DNA双链断裂损伤和内质网压力，上调转录因子CHOP的表达并激活JNK蛋白激酶活性，诱导不依赖促凋亡蛋白Bax和Bak的细胞凋亡[8]。本研究深入探讨了OC对线粒体功能的影响，为从天然产物中筛选抗肿瘤新药的研究提供了科学依据。

    1 材料与方法

    1.1实验材料

    1.1.1细胞系野生型(WT)及bax/bak基因双敲除(DKO)小鼠胚胎成纤维细胞MEF和人结肠癌细胞HCT116由英国Beatson癌症研究所Kevin Ryan教授提供 ......