孔思远 吴 蓉 蔡双璠 谭红胜

    (1 上海中医药大学，上海，201203; 2 中药创新药物研发上海高校工程研究中心，上海，201203)

    夏枯草抗疱疹病毒多糖的提取及纯化工艺研究

    孔思远1,2吴蓉1,2蔡双璠1,2谭红胜1,2

    (1 上海中医药大学，上海，201203; 2 中药创新药物研发上海高校工程研究中心，上海，201203)

    目的：优化夏枯草抗疱疹病毒多糖的提取及纯化工艺，为新药研究提供科学依据。方法：以多糖含量和浸膏得率为指标，采用L9(34)正交试验法对夏枯草多糖提取过程中的提取次数，加水倍量及提取时间3个因素进行优化研究；以多糖含量及体外抗单纯性疱疹病毒I型(HSV-1)活性为考察指标，对超滤和醇沉两种纯化技术进行比较。结果：最优水提工艺为第1次加水14倍，第2、3次加水12倍，提取3次，每次提取时间1.5 h；采用超滤和醇沉两种技术分别纯化所得多糖。通过MTT法测得醇沉多糖和超滤多糖抑制HSV-1的IC50分别为(93.99±13.12)μg/mL和(51.35±15.30)μg/mL，结果表明超滤技术制备的多糖提取物抗单纯性疱疹病毒活性显著高于醇沉技术。结论：采用超滤技术制备的夏枯草多糖具有较高的含量及抗单纯性疱疹病毒活性，可作为夏枯草多糖开发新药的纯化工艺。

    夏枯草；抗疱疹病毒；多糖；提取；纯化；醇沉；超滤

    夏枯草为唇形科植物夏枯草PrunellavulgarisL.的干燥果穗，因“夏至后即枯”而得名。具有清肝泄火，明目，散结消肿等功效。用于治疗目赤肿痛，目珠夜痛，头痛眩晕，瘰疬，瘿瘤，乳痈，乳癖，乳房胀痛等，民间饮用的历史已有1000多年。现代药理及化学成分研究证明，夏枯草主要含有三萜、黄酮、苯丙素、甾体、有机酸、挥发油及多糖类等成分[1]，具有降血压、降血糖、抗菌、抗病毒、调节免疫力等作用。从夏枯草中分离纯化的多糖有抗Ⅰ型单纯性疱疹病毒(HSV-1)和Ⅱ型单纯性疱疹病毒(HSV-2)的作用，其作用机制不同于目前临床药物阿昔洛韦(ACV)，可能不是直接作用于病毒的复制环节，而是阻止病毒吸附和穿入宿主细胞，以及促进淋巴细胞转化增殖和诱生干扰素等免疫调节作用，因此对标准病毒株和临床耐药株均有效，且不易产生耐药性[2-6]。

    本实验拟采用L9(34)正交试验对水提多糖过程中的提取次数、加水倍量和提取时间进行优选，以体外抗单纯性疱疹病毒活性为评价指标，对超滤纯化多糖技术与传统的醇沉纯化多糖工艺进行比较，为后续将夏枯草多糖开发为抗单纯性疱疹病毒的新药提供科学依据 ......