谢 彤 杜丽娜 徐建亚 沈存思 汪受传 单进军

    (南京中医药大学中医儿科学研究所，江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室，南京，210023)

    基于脂质代谢网络的虎杖抗呼吸道合胞病毒肺炎代谢组学研究

    谢彤杜丽娜徐建亚沈存思汪受传单进军

    (南京中医药大学中医儿科学研究所，江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室，南京，210023)

    目的：探讨虎杖用于干预呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)诱导BALB/c小鼠肺炎的脂质代谢网络的变化。方法：选取18只BALB/c小鼠，随机分为空白组、RSV肺炎组、虎杖组3组，RSV肺炎组、虎杖组滴鼻给予RSV病毒诱导产生肺炎，虎杖组灌胃给予虎杖提取物给予治疗，空白对照组灌胃给予生理盐水作为对照。实验结束，取血浆测定其血浆中的脂质代谢物质。建立基于高效液相-线性离子阱-静电场轨道杂交质谱(HPLC-LTQ-Orbitrap-MS)的脂质代谢组学技术，表征3组小鼠血浆中脂质代谢轮廓的变化，通过单因素方差分析筛选差异性化合物(P1 材料

    1.1仪器与试剂非靶标脂质成分的检测采用线性离子阱-高分辨静电场轨道杂交质谱(LTQ-Orbtraip XL，Thermo fisher，America)，高效液相色谱仪(U3000，DIONEX，America)，数据采集通过Thermo Xcalibur 2.2 SP1.48软件(Thermo fisher，America)；高速冷冻离心机(Beckman，America)；SpeedVac离心浓缩仪(Thermo fisher)。配制流动相和样品处理所用甲醇、乙腈均为质谱级(99.8%，Merck，Germany)，脂质提取所用甲基叔丁基醚(Methyl tert-butyl ether，MTBE，ROE，America)、异丙醇为质谱级(99.8%，ROE，America)，水为自制去离子水(Millipore，America)。

    1.2动物、细胞和病毒清洁级BALB/c小鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，18只，雌性，体重16～18 g，许可证号为：SCXK(沪)2012-0002。人喉癌上皮细胞(Hep-2细胞)由中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心提供。呼吸道合胞病毒A亚型Log株由武汉国家典型培养物保藏中心提供。

    2 方法

    2.1药物的制备虎杖购自安徽亳州中药饮片厂，批号为111208。经南京中医药大学药学院刘圣金博士鉴定 ......