罗云春 易 文 姚宇宙 朱 妮

    (三峡大学第一临床医学院/宜昌市中心人民医院，宜昌，443000)

    溃结方对溃疡性结肠炎大鼠血清炎性反应因子与肠黏膜修复作用的研究

    罗云春 易 文 姚宇宙 朱 妮

    (三峡大学第一临床医学院/宜昌市中心人民医院，宜昌，443000)

    目的：观察溃结方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠炎性反应因子及JAK2/STAT3信号通路的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：采用2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液灌肠法建立溃疡性结肠炎大鼠模型，每日灌胃给予溃结方治疗，酶联免疫吸附法(ELISA法)测定UC大鼠血清促炎因子IL-6、TNF-α及抗炎因子IL-10、IL-4的水平，肉眼观察大鼠结肠病理形态学改变并进行评分，免疫组织化学法(SP法)测定结肠组织中JAK2和STAT3蛋白的表达。结果：溃结方可显著降低UC大鼠血清IL-6、TNF-α水平，同时升高抗炎因子IL-10、IL-4，差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级雄性SD大鼠50只，体重(200±20)g，从三峡大学实验动物中心购入，动物合格证号：2013-0023。

    1.2 药物 溃结方各成分均同一批次购于三峡大学附属医院。柳氮磺吡啶肠溶片(Sulfasalazine，SASP)，上海信谊药厂生成，批号20131111，120 mg/粒，用蒸馏水配置成浓度为0.15 g/mL悬液。

    1.3 试剂与仪器 2.4.6-三硝基苯磺酸(TNBS)，Sigma公司；白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-)α、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)ELISA检测试剂盒，广州杰特伟生物科技有限公司；兔抗鼠JAK-2和STAT-3抗体(美国Santa Cruz公司)，羊抗兔二抗(美国Santa Cruz公司)，总蛋白提取试剂盒，BCA蛋白定量试剂盒，4%多聚甲醛，低温高速离心机(美国Beckman)，高速组织匀浆仪(瑞士罗氏)，全自动酶标仪(美国PerkinElmer公司)，Olympus倒置生物显微镜(日本Olympus公司)，Olympus显微拍照系统(日本Olympus公司)。

    1.4 动物模型建立 SD大鼠适应性喂养1周，随机分为空白组，模型组，溃结方组，SASP组，每组各10只，所有大鼠造模前禁食24 h，不禁饮水。造模组大鼠采用乙醚麻醉，将外径2.0 mm、长约12 cm左右的输液管(输液管先用液体石蜡油润滑)，从大鼠肛门逆行插入结肠内深约4.0 cm处 ......