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编号:13618138
MTT法检测通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜成纤维细胞增殖的影响(2)
http://www.100md.com 2017年3月1日 《世界中医药》 20175
     1.1.2 试剂与仪器

    胎牛血清购自四季青公司。RPMI-1640培养基、胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)、I型胶原酶均购自Gibco公司。MTT(噻唑蓝)、二甲基亚砜(DMSO)购自Sigma公司。ELX800型酶联免疫检测仪(美国生物技术仪器公司)、BH-2型倒置显微镜(日本Olympus公司);96孔细胞培养板,美国Corning;CO2培养箱,美国Thermo Scientific;25 cm2培养瓶,丹麦NUCU公司;四环冻干机,北京四环科学仪器厂有限公司。

    1.1.3 药物制备

    通络止痛处方由桃仁、红花、桂枝、白芍、制草乌、细辛、川椒、牛膝、乳香、没药组成,购于北京中医药大学第三附属医院药房。将上述中药饮片按成方比例置煎煮容器内,加水浸泡,煮沸30 min,弃药渣取汤剂,经过离心机2 000 r/min离心,弃药渣取汤剂,利用冷冻干燥机进行冷冻干燥,粉末状,PBS溶解,用0.22 μm微孔滤器过滤除菌,配制成高、中、低浓度3组依次为:高浓度组:10/42 mg/mL、10/43 mg/mL、10/44 mg/mL;中浓度组:10/45 mg/mL、10/46 mg/mL、10/47 mg/mL;低浓度组:10/48 mg/mL、10/49 mg/mL、10/410mg/mL;空白组:0 mg/mL ......
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