基于iTRAQ技术的中医实热“上火”血清蛋白质组学特征分析(1)
摘要 目的：筛选实热“上火”血清差异表达蛋白，为实热“上火”机制的深入研究提供科学依据。方法：采用相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)对血清蛋白质进行检测，结合生物信息学分析(GO、STRING)筛选实热“上火”与正常非“上火”人群差异显著的蛋白质。结果：与正常对照组比较，实热上火组血清筛选出49个差异蛋白质，其中上调的22个，下调的27个。载脂蛋白C3(Apo C3)、乳酸脱氢酶(LDH)和维生素K依赖蛋白S(PROS1)等显著上调，而载脂蛋白A4(Apo A4)、超氧化物歧化酶3(SOD3)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)等显著下调。结论：观察组脂质代谢、糖酵解异常与氧化应激、炎性反应的发生密切相关，且凝血功能下降，易造成出血，筛选的差异蛋白可为实热“上火”的生物学基础研究提供依据。
关键词 实热上火；iTRAQ；血清蛋白质组学；生物标志物
Abstract Objective：To screen differentially expressed proteins in excessive heat “shanghuo” serum and provide a scientific basis for in-depth study on the mechanism of excessive heat “shanghuo”. Methods：Serum proteins were detected by relative and absolute quantitative isotope labeling (iTRAQ)， and bioinformatics analysis (GO， STRING) was used to screen the proteins that were significantly different between the normal fever group and normal non-lit group subjects. Results：Compared with the normal control group， 49 differentially expressed proteins were screened by excessive heat “Shanghuo” group， with 22 up-regulated and 27 down-regulated. Apolipoprotein C3 (Apo C3)， lactate dehydrogenase (LDH)， and vitamin K-dependent protein S (PROS1) were significantly up-regulated while Apo A4， SOD3 and the plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) and so on were significantly down-regulated. Conclusion：The abnormal lipid metabolism and glycolytic abnormality in the “shanghuo” crowd are closely related to the occurrence of oxidative stress and inflammation， and the coagulation function is decreased， leading to easily bleeding. The differential proteins screened can provide references for biological foundation of basic research on “shanghuo”.
Key Words Excessive heat； iTRAQ； Serum proteomics； Biomarker
中圖分类号：R22；R24文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.008
“上火”是对身体出现口疮、鼻衄、牙宣、目赤、咽痛、口干便秘等症状的统称，发生率较高，且与口腔溃疡、失眠症等多种常见病的发病密切相关[1]。《素问·阴阳应象大论》“壮火食气”“少火生气”，论述了火的不同作用；火为热之极、热为火之渐，火热同类，常连在一起。《素问·至真要大论》病机十九条，其中9条涉及“火、热”病机，强调了火热致病的重要性。现代医学对“上火”还没有统一认识，认为“上火”与机体免疫功能失调情况下出现的局部感染、应激状态下机体内环境失衡及能量代谢等相关，医学上也称之为应激性疾病[2-3]。随着社会的发展和亚健康观念的提出，人们的健康意识不断提高，现代医学对上火尚缺乏有效的治疗方法，而中医学分别采用清热泻火法、滋阴降火法等治疗，疗效较为明显，但是中医注重宏观观察，缺乏对“上火”科学内涵的认识。因此，运用现代的科学技术方法来研究“上火”发生机制，不仅能够丰富其科学内涵，同时对于防治“上火”和提高人们的健康水平也有着重要的现实意义。
生命活动的功能执行者是蛋白质，绝大多数生命调控过程、各种代谢过程、疾病的原发过程以及大多数药物作用靶标均发生在蛋白质水平。现阶段，血清蛋白质组学的研究越来越受到国内外的关注，血清中含有的蛋白质种类很多，只有不断进行筛选和鉴定，才能进一步帮助探明疾病的发生、监控疾病的进程和每个阶段相应蛋白表达水平的关联性及规律性[4]。相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术自开展以来，在疾病研究和药物监测方面应用广泛，其不但可以检测出更多的低丰度蛋白，甚至可以灵敏的检测到其他技术无法检测到的跨膜蛋白，具有高灵敏度、高分辨率、标记效率高、样品兼容性和重复性好等优点，在血清蛋白质组学的研究中被广泛应用[5-6]。, http://www.100md.com(陈娟 徐莉 谢冠群 周佳 谢志军 甘静 范永升)
关键词 实热上火；iTRAQ；血清蛋白质组学；生物标志物
Abstract Objective：To screen differentially expressed proteins in excessive heat “shanghuo” serum and provide a scientific basis for in-depth study on the mechanism of excessive heat “shanghuo”. Methods：Serum proteins were detected by relative and absolute quantitative isotope labeling (iTRAQ)， and bioinformatics analysis (GO， STRING) was used to screen the proteins that were significantly different between the normal fever group and normal non-lit group subjects. Results：Compared with the normal control group， 49 differentially expressed proteins were screened by excessive heat “Shanghuo” group， with 22 up-regulated and 27 down-regulated. Apolipoprotein C3 (Apo C3)， lactate dehydrogenase (LDH)， and vitamin K-dependent protein S (PROS1) were significantly up-regulated while Apo A4， SOD3 and the plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) and so on were significantly down-regulated. Conclusion：The abnormal lipid metabolism and glycolytic abnormality in the “shanghuo” crowd are closely related to the occurrence of oxidative stress and inflammation， and the coagulation function is decreased， leading to easily bleeding. The differential proteins screened can provide references for biological foundation of basic research on “shanghuo”.
Key Words Excessive heat； iTRAQ； Serum proteomics； Biomarker
中圖分类号：R22；R24文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.008
“上火”是对身体出现口疮、鼻衄、牙宣、目赤、咽痛、口干便秘等症状的统称，发生率较高，且与口腔溃疡、失眠症等多种常见病的发病密切相关[1]。《素问·阴阳应象大论》“壮火食气”“少火生气”，论述了火的不同作用；火为热之极、热为火之渐，火热同类，常连在一起。《素问·至真要大论》病机十九条，其中9条涉及“火、热”病机，强调了火热致病的重要性。现代医学对“上火”还没有统一认识，认为“上火”与机体免疫功能失调情况下出现的局部感染、应激状态下机体内环境失衡及能量代谢等相关，医学上也称之为应激性疾病[2-3]。随着社会的发展和亚健康观念的提出，人们的健康意识不断提高，现代医学对上火尚缺乏有效的治疗方法，而中医学分别采用清热泻火法、滋阴降火法等治疗，疗效较为明显，但是中医注重宏观观察，缺乏对“上火”科学内涵的认识。因此，运用现代的科学技术方法来研究“上火”发生机制，不仅能够丰富其科学内涵，同时对于防治“上火”和提高人们的健康水平也有着重要的现实意义。
生命活动的功能执行者是蛋白质，绝大多数生命调控过程、各种代谢过程、疾病的原发过程以及大多数药物作用靶标均发生在蛋白质水平。现阶段，血清蛋白质组学的研究越来越受到国内外的关注，血清中含有的蛋白质种类很多，只有不断进行筛选和鉴定，才能进一步帮助探明疾病的发生、监控疾病的进程和每个阶段相应蛋白表达水平的关联性及规律性[4]。相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术自开展以来，在疾病研究和药物监测方面应用广泛，其不但可以检测出更多的低丰度蛋白，甚至可以灵敏的检测到其他技术无法检测到的跨膜蛋白，具有高灵敏度、高分辨率、标记效率高、样品兼容性和重复性好等优点，在血清蛋白质组学的研究中被广泛应用[5-6]。, http://www.100md.com(陈娟 徐莉 谢冠群 周佳 谢志军 甘静 范永升)
参见：首页 > 中医药 > 中医药常识 > 中医基础 > 上火