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编号:13587554
麻黄细辛附子汤干预树突状细胞IL—4/STAT6的研究(2)
http://www.100md.com 2018年5月1日 《世界中医药》 20189
     1.2.2 药物制备与筛选

    1.2.2.1 麻黄细辛附子汤水提液制备 麻黄细辛附子汤,常用量为麻黄6 g、附子9 g、细辛3 g,用超纯水按比例煎煮药物1 h,使药物终浓度达1 g/mL。12 000 r/min高速离心2次,10 min/次,收集上清,用0.22 μm的微孔滤器过滤除菌并分装,置-20 ℃保存备用。

    1.2.2.2 麻黄细辛附子汤干预浓度的筛选 为了筛选适宜浓度的麻黄细辛附子汤干预树突状细胞,收集分选的树突状细胞,调整细胞浓度为5×105,吹打均匀,加入96孔板,每孔100 μL,10倍稀释等比例稀释1 g/mL的麻黄附子细辛汤水提液,按顺序加入96空中,每个浓度的水提液设6个复孔,把细胞培养板放置于37 ℃、含5% CO2、饱和湿度培养箱中培养24 h后,每孔加入10 μL CCK8试剂,酶标仪测试1次/0.5 h,并记录数据。调整水提液浓度,重复实验,发现10 mg/mL以内的麻黄细辛附子汤对树突状细胞的毒性很小,实验选择麻黄细辛附子汤干预浓度为2 mg/mL ......
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