1.2.3.3 Western Blot实验 采用Western-Blot方法检测细胞凋亡相关分子caspase-3表达变化，取对数生长期A549细胞以1×106细胞/孔接种于6孔板内，试验分蟾方高、中、低剂量组、消癌平组、生理盐水组。待细胞贴壁后，吸去细胞培养液，每孔加400 μL试验药液(同1.5用药剂量)，培养48 h，胰酶消化后3 000 r/min离心收集细胞于EP管中，细胞裂解液提取细胞总蛋白，紫外分光光度计测定总蛋白浓度，-80 ℃冻存备用。各组分别提取50 μg蛋白，加热变性，SDS-PAGE胶电泳，将蛋白转移到PVDF膜上，脱脂奶粉室温封闭1 h，0.1% TBST液洗膜3次，一抗(1∶100稀释)室温孵育2 h，TBST液洗膜3次，加入二抗稀释液，避光孵育2 h，TBST液洗膜3次，中途4 ℃过夜。采用增强化学发光法显影，凝胶图像分析系统分析，同时以兔抗大鼠β-actin抗体做对照，试验重复3次。采用Motic 6.0数码医学图像分析系统，分析caspase-3表达阳性积分光密度值，分析相对表达量 ......