1.3 单细胞测序技术基本流程

    单细胞测序技术是近年来迅速发展的生命科学前沿技术，它在单细胞水平揭示细胞的基因结构和基因表达状态，反映细胞间的异质性具有独特的优势，为生命科学的研究打开了新的大门。该技术一般流程可分为单细胞分离、核酸扩增、高通量测序、数据分析这几个步骤[24-25]。简要流程见图1。

    2 单细胞测序在医学领域中的应用

    2.1 肿瘤

    首先应用最广的是肿瘤方向的研究，在肿瘤研究中的应用表明，遗传或基因组变异可导致肿瘤组织内具有不同遗传和表型特征的细胞，使肿瘤组织具有高度异质性。这种高度的异质性可能与肿瘤发生和转移的机制有关[26-31]，传统的测序方法只能检测到细胞的数量，得到一组细胞的平均信号，掩盖肿瘤细胞的异质性。单细胞测序技术可以很好的弥补传统测序方法的不足，通过检测肿瘤细胞的异质性，绘制肿瘤细胞与肿瘤微环境的细胞图谱，进一步明确肿瘤组织内的细胞群，寻找特异性标志物，解释肿瘤发生、转移等一系列问题。最早Navin等[13]使用单细胞mRNA测序(scRNA-seq)了解乳腺癌的起源首次单核测序分析基因组拷贝数变异，研究2例乳腺癌患者的肿瘤种群结构和进化 ......