补骨脂二氢黄酮甲醚调控Gamma delta T细胞消减胃癌SGC-7901研究(3)
1.2.2.3 流式细胞术检测不同浓度BVC诱导前后γδT免疫细胞中藻红蛋白标记的PF、GZMB及藻蓝蛋白标记的CD107a表达 对照组:γδT细胞(未加入补骨脂二氢黄酮甲醚)。实验组:补骨脂二氢黄酮甲醚终浓度设置为2.5、10、40、160 nmol/L。1.2.2.4 LDH法测定不同浓度BVC诱导前后的γδT细胞消减SGC-7901细胞程度 对照组:γδT细胞+胃癌SGC-7901细胞(未加入补骨脂二氢黄酮甲醚)。实验组:补骨脂二氢黄酮甲醚终浓度分别为2.5、10、40、160 nmol/L。
1.2.3 检测指标与方法
1.2.3.1 γδT细胞培养前后纯度鉴定的检测 γδT细胞百分比、FCM。具体如下:取康壮志愿者抗凝血20 mL,用淋巴细胞分离液获取具有单个核的细胞(1 800 r/min,离心12 min,离心半径为12 cm,下同),等渗盐水洗涤2次(1 800 r/min离心,9 min/次),用GT-T551 H3培养基调整细胞密度为1.0×105/mL,置于75 cm2细胞培养瓶中 ......
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