李静雨，唐安洲，王立升，冉 伟，谢利红，钟华林

    广西医科大学第一附属医院，广西南宁 530021

    鼻咽癌是我国最常见的头颈部肿瘤，尤其在两广地区，发病率更高。目前鼻咽癌的唯一根治性治疗手段是放疗，但是由于肿瘤的远处转移和放射的局部损伤作用，给进一步改善晚期鼻咽癌患者的预后和生活质量带来了困难[1]，因此需要越来越多的化疗手段介入。苦参碱是近年受到关注的抗肿瘤成分，并且有研究表明其具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，如鼻咽癌[2]、肝癌[3]、膀胱癌[4]等，并且在临床上的应用也非常广泛，但是它的生物利用率并不是特别高。为了使其活性和生物利用度更高，笔者以苦参碱为先导化合物，通过化学合成方法对其结构进行改造，合成了20个结构新颖的苦参碱衍生物。苦参碱改构体X正是从中初步筛选出的具有抗肿瘤活性的成分，本实验研究了该药对人鼻咽癌细胞CNE2体外增殖的影响，并探讨其机制，此研究尚属首例。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞 人鼻咽癌细胞株CNE2由中南大学湘雅中心实验室购得，人脐静脉内皮细胞株购自上海生命科学院，由本实验室接种保存。CNE2细胞和人内皮细胞株培养于含10%灭活胎牛牛血清，100 U/ml青霉素和100 U/ml链霉素的RPMI-1640培养液中，置于37℃、相对湿度90%，5%CO2培养箱内培养，定期观察，用0.25%胰蛋白酶联合0.02%EDTA消化传代。

    1.1.2 药物 苦参碱改构体X由广西大学王立升教授惠赠，化学名称14-噻吩基次亚甲基苦参碱。药物先以无水乙醇溶解，然后用生理盐水等体积稀释，过滤除菌，4℃保存。其结构式见图1。

    1.1.3 试剂和仪器 RPMI-1640改良型培养液购自hyclone公司，胎牛血清购自杭州四季青公司，胰蛋白酶购自GIBCO公司,噻唑兰(MTT)、PBS、DMSO 购自 Sigma公司，凯基 Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒和凯基细胞周期试剂盒 ......