黏蛋白1在低分化胃癌细胞中的表达及临床意义
玻片,活化,1材料与方法,1细胞培养和细胞株处理,2试剂,3间接免疫荧光染色法检测黏蛋白1在胃黏膜上皮细胞系和低分化胃腺癌细胞系中的表达,4结果判定,5统计学方法,2结果,3讨论
张 波,邸雅南,彭德银北京航天总医院消化内科,北京 100076
胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展是一个多因素、多步骤的复杂过程。随着人们对肿瘤研究的不断深入,黏蛋白1(mucin1,MUC1)作为黏蛋白家族中的重要成员之一,在胃癌中的表达和转移中的作用也日益凸显出来。本文就MUC1在转化的可传代人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)和低分化胃腺癌细胞系(BGC-823)中的表达及其意义进行探讨。
1 材料与方法
1.1 细胞培养和细胞株处理
SV40病毒转化的可传代人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)由北京市肿瘤防治研究所提供;低分化胃腺癌细胞系(BGC-823)由哈医大肿瘤研究所提供。GES-1和BGC-823用含15%灭活胎牛血清和适量抗生素的RPMI Medium 1640培养液,在含5%CO2、37℃条件下培养。在24孔板中每孔均放置5 mm×5 mm的盖玻片一块,并加入对数期的GES-1、BGC-823 细胞分别为(4×104)、(10×104)个,贴壁生长至占盖玻片面积的80%时,进行固定、染色。
1.2 试剂
羊抗人MUC1多克隆抗体购自SANTA CRUZ公司;FITC-兔抗山羊IgG购自北京中杉;RPMI Medium 1640购自GIBCO;FBS购自四季青公司。
1.3 间接免疫荧光染色法检测黏蛋白1在胃黏膜上皮细胞系和低分化胃腺癌细胞系中的表达
弃去24孔板中培养液,滴加pH 7.4的PBS冲洗标本,轻微震荡;4%多聚甲醛室温固定30 min;0.5%Triton X-100/PBS液抽提30 min;然后用PBS冲洗 ......
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