李北林 邓益斌 罗艳红

    [摘要] 目的 觀察松花粉对人肝癌SK-Hep-1细胞凋亡和自噬的影响，探讨松花粉抗肿瘤作用及机制，为松花粉的临床应用提供实验依据。 方法 体外培养SK-Hep-1细胞，随机分为4组，分别为对照组、松花粉小剂量组(30 mg/mL)、松花粉中剂量组(45 mg/mL)、松花粉大剂量组(60 mg/mL)。CCK-8法检测不同浓度松花粉干预不同时间(12、24、48、72 h)后的SK-Hep-1细胞抑制率;松花粉处理48 h后，相差显微镜和Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学;流式细胞术观察细胞凋亡率;RT-PCR检测自噬相关mRNA表达水平。 结果 CCK-8法检测显示，松花粉能显著抑制SK-Hep-1细胞增殖，并具有时间和剂量依赖性;相差显微镜显示松花粉可以抑制细胞的增殖;Hoechst33258荧光染色显示，与对照组比较，松花粉小、中、大剂量组细胞形态发生明显的凋亡样改变;Annexin V-FITC/PI双染法结果显示，与对照组比较，松花粉小、中、大剂量组细胞凋亡率明显升高，差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01);RT-PCR分析显示，与对照组比较，松花粉干预48 h后，松花粉小、中、大剂量组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显上调，而P62表达下调，差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。 结论 松花粉能有效抑制人肝癌SK-Hep-1细胞增殖，促进其凋亡，并诱导其发生自噬，松花粉可能通过诱导自噬促进肝癌细胞凋亡。

    [关键词] 松花粉;SK-Hep-1细胞;凋亡;自噬

    [中图分类号] R285? ? ? ? ? [文献标识码] A? ? ? ? ? [文章编号] 1673-7210(2020)05(a)-0013-05

    Study on the effect of apoptosis and autophagy of pine pollen on human hepatocellular carcinoma SK-Hep-1 cells ......