关媛月 高玉雪 庄 园 陈德喜 王延军

    首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所，北京 100069

    乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)是一种以体液和血液传播为主的嗜肝DNA 病毒[1]，HBV 持续感染所致的肝癌是影响全球的一个重大健康问题，全世界至少超过3.5 亿是慢性HBV 的感染者[2]，每年有约887 000 人死于HBV 相关的肝病。尽管已证实核苷(核苷酸)类似物(NAs)和聚乙二醇化干扰素-α(Peg-IFNα)可有效抑制HBV 复制，但NAs 需要长期服用，α 干扰素(IFNα)治疗则易产生各种副作用，且这两种药物均难以根除HBV，实现慢乙肝的临床治愈[3]。因此，研究HBV 感染相关特异性蛋白标志物，寻找新的药物治疗靶点，对于临床具有重要的意义和价值。本研究使用同位素标记相对和绝对定量(isotope tagging for relative and absolute protein quantitation，iTRAQ)技术对稳定表达HBV 的HepG2.2.15 细胞株及其亲本HepG2 细胞株进行鉴定和定量分析，筛选出差异蛋白，通过生物信息学分析差异蛋白功能及相应通路，为进一步探讨HBV 致病的分子机制提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞

    HepG2 和HepG2.2.15 的肝癌细胞系于北京市肝病研究所保存。

    1.2 主要仪器与试剂

    高效液相色谱仪(Nano，HPLC)、Durashell-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm ......