周海银 隆彩霞 罗 兰 陈艳瑛 刘萍萍 肖政辉 张树菊

    1.湖南省儿童医院重症医学科，湖南长沙 410007；2.湖南省儿童医院检验科，湖南长沙 410007

    脓毒症相关性脑病是一种弥散性脑功能障碍的疾病，曾被称为“感染中毒性脑病”“脓毒症脑病”等[1]。自噬是真核生物中一种进化上高度保守的物质分解代谢途径，参与细胞代谢、蛋白质分泌和细胞介导的免疫反应[2-3]。研究报道，脓毒症相关性脑病大鼠海马区神经细胞存在自噬现象[4]，但这种自噬与脓毒症脑病之间的关系仍不清楚。

    石杉碱甲(Huperzine A，HupA)是一种新型石松类生物碱有效单体，具有多靶点作用，除抑制乙酰胆碱酯酶活性外，还能对抗多种因素诱发的氧化应激和细胞凋亡等神经元毒性作用。本研究拟观察HupA 对脓毒症大鼠脑病的保护作用，以及HupA 是否通过核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)信号通路调节脓毒症时海马细胞自噬。

    1 方法与材料

    1.1 仪器与试剂

    HupA(美国Sigma 公司)；细胞裂解液和BCA 蛋白含量测定试剂(江苏碧云天公司，批号：P0013B，K11606D)；NF-κB、LC-3、Beclin1、Rab7 和LAMP-1抗体(美国Abcam 公司，批号：ab320376，ab327450，ab326510，ab326327，ab109390)；荧光倒置显微镜(日本Olympus)。

    1.2 动物分组与模型建立

    选用健康雄性Wistar 大鼠60 只 ......