自噬调控在大鼠缺血性脑卒中亚急性期神经修复中的机制研究
腺嘌呤,雷帕,脑缺血,1材料与方法,1实验动物,2主要药物与试剂,3动物分组及造模,4干预方法,5行为学评估,6脑梗死体积检测,7免疫荧光染色,8Westernblot检测,9统计学方法,2结果,1四组神
周 平 徐伟杰 臧 瑞 李友宽 武煜明1.昆明卫生职业学院解剖教研室,云南昆明 650600;2.云南省昭通市中医医院急诊科,云南昭通 657000
脑卒中是一种高发病率及致残率的急性脑血管疾病,其中约80%为缺血性脑卒中[1-2],脑组织局部血流供应完全中断会导致细胞迅速死亡,使患者出现认知和运动功能障碍[3]。组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)是目前治疗缺血性脑卒中的有效方法,但tPA 具有严格的适应证和狭窄的窗口期,仅有5%的患者可以进行tPA 治疗[4]。脑卒中核心区周围的脑缺血半影区内细胞凋亡和自噬并存,自噬将受损细胞器传递至溶酶体进行降解并产生能量[5-6]。本研究选择大鼠左侧大脑中动脉闭塞再灌注模型模拟缺血性脑卒中亚急性期,通过自噬诱导剂及抑制剂干预自噬活性探究神经元自噬的相关机制[7]。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选取8 周龄250~280 g 的SPF 级雄性健康SD 大鼠96 只,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,生产许可证号为:SCXK(湘)2019-0004;合格证号:No.430727210101005026。饲养于昆明卫生职业学院(以下简称“我校”)实验动物中心,并通过我校动物伦理委员会审批(R-062021LH-122)。
1.2 主要药物与试剂
TTC 试剂(G3005)、BCA 蛋白浓度测定试剂盒(P0010)、RIPA 裂解液(P0013B)、电致化学发光试剂购自上海碧云天生物技术有限公司;微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)(83506)、Becline-1(3738)、β-actin(3700S)、神经元核心抗原(neuronal nuclei ......
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