当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国实用医药》 > 2007年第5期
编号:11525839
胃癌中诱导型一氧化氮合酶、IL-8的表达与意义
http://www.100md.com 2008年2月24日 《中国实用医药》 2007年第5期
胃癌中诱导型一氧化氮合酶、IL-8的表达与意义
胃癌中诱导型一氧化氮合酶、IL-8的表达与意义
胃癌中诱导型一氧化氮合酶、IL-8的表达与意义
胃癌中诱导型一氧化氮合酶、IL-8的表达与意义

     摘要:目的探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible NOs,iNOS)和白介素8(IL-8)在胃癌中的表达及意义。方法胃癌组织标本70例(包括癌组织和非癌组织),采用HE染色对胃癌标本进行组织分型,免疫组织化学sABc法检测不同类型胃癌组织和不同位置中的iNOs和IL-8的表达。结果 ①64.29%(45/70)胃癌组织中表达iNOS蛋白,在高、中分化腺癌中iNOs表达占46.67%(14/30);在低分化腺癌INOs表达占77.50%(31/40);iNOS的表达与胃癌组织分化程度显著相关;②IL-8在高、中分化与低分化腺癌中的表达率没有差异,在癌组织和非癌组织两组中lL-的表达率,有显著性差异。结论 iNOS和IL-8可能在胃黏膜细胞癌变过程中起重要作用。

    关键词:诱导型一氧化氮合酶;IL-8;胃癌

    目前,幽门螺杆菌是引起人类胃癌的主要生物学因素,并被WHO列为I类致癌因子。HD感染导致胃癌的发生,除了致病原的某些特性之外,还可以使胃黏膜组织发生慢性炎症反应,最终导致胃癌的发生,而iNOS和IL-8是炎症反应过程中重要的酶和细胞因子,为探讨它们在胃癌发生和演进中是否发挥重要作用,本实验采用免疫组织化学法检测不同类型胃癌组织中iNOS和IL-8的表达,以进一步阐明胃癌的发病机制。
, 百拇医药
    1 临床资料

    1.1 研究对象 胃癌组织手术标本70例,系2003年9月~2004年9月哈尔滨医科大学大附属二院、黑龙江省医院外科术后切除标本(包括癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜)。其中,男46例,女24例,年龄4l~72岁(平均60.2岁),均经病理学检查。

    1.2主要试剂与仪器 兔抗人IL-8和iNOS多克隆抗体;山羊抗兔IgG抗体;DAB显色试剂盒(以上试剂由武汉博士德生物工程有限公司提供);微量加样器,数码相机(s∞JY公司,Mvc—FD83型)。

    1.3方法

    1.3.1 HE染色步骤略。

    1.3.2免疫组织化学 采用sAJBc免疫组织化学染色方法。0.3%H2O2阻断内源性过氧化物酶30min,PBS冲洗5min×3次;微波修复抗原;滴加正常山羊血清封闭;滴加1:50稀释的兔抗人IL_-8的多克隆抗体(或1:60稀释iNOS的多克隆抗体),室温孵育下过夜;PBS冲洗5min×3次;滴加山羊抗兔IgG抗体;PBs冲洗5min×3次;滴加辣根过氧化物酶;PBS冲洗5min×3次;DAB显色剂显色;苏木素轻度复染,封片。结果判断:用PBS代替一抗作为阴性对照,胞浆内有棕黄色颗粒状物质者为阳性细胞。
, 百拇医药
    1.3.3统计学分析采用x2检验。

    2 结果

    2.1 临床病理资料和HE染色所见 70例胃癌病例中,其中高、中分化腺癌占42.86%(30/70),高、中分化型腺癌均有完整的腺腔形成,有的形成乳头状结构,部分腺腔内还有坏死组织。低分化腺癌占57.14%(40/70),低分化腺癌无完整的腺腔形成,癌细胞成条索状分布。

    2.2 免疫组织化学结果

    2.2.1 iNOS的表达 在30例高、中分化腺癌中,有14例iNOS表达阳性,占46.67%;在40例低分化腺癌中,有3l例iNOS表达阳性,占77.50%。大多数iNOS均在癌细胞胞浆中表达阳性,胞浆呈棕黄色,占64.29%(45/70)。实验中发现癌细胞周围有大量炎细胞表达阳性。iNOS的表达率详见表1。iNOS阳性表达见图1。
, 百拇医药
    2.2.2 IL-8的表达IL-8在癌组织中表达阳性占58.57%(41/70),镜下可见炎细胞胞浆呈黄棕色;在非癌组织中表达阳性占34.29%(24,70)。统计癌组织与非癌组织两组IL-8的表达率,可见有显著性差异,详见表2。

    IL-8在高、中分化脲癌与低分化腺癌中均有表达。在30例高、中分化腺癌中,有17例II-8表达阳性,占56.67%;在40例低分化腺癌中,有24例IL-8表达阳性,占60.00%。IL-8在高、中分化与低分化腺癌中的表达率没有差异。详见表3。IL-8在高分化腺癌的阳性表达见图2。

    在rip感染后,Hp分泌的脂多糖或其他膜蛋白从胃腔表面扩散人下面的黏膜里,它们与胃窦部黏膜上皮细胞特异性糖脂受体结合,并定植于胃窦部黏膜,产生非特异性免疫。体外实验证实HP尿素酶可以通过非脂多糖途径激活单个核细胞,导致免疫炎症介质、氧自由基的分泌及多种细胞因子如IL-6、IL-lβ肿瘤坏死因子及血小板活化因子的释放。长期慢性炎症刺激及胃窦部微环境的改变可能会导致胃黏膜腺颈部多潜能干细胞向肠型上皮分化,形成肠上皮化生及不典型增生。此外细胞因子又可激活胃肠道黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、固有层中的各种炎症细胞,使激活后的中性粒细胞和单核巨噬细胞中的iNOS表达增强,其产物NO增多。NO与其代谢产物活性氧类可氧化DNA,造成链断裂、交叉联结等多种DNA损伤,或通过氧化应激形成过氧化亚硝酸盐造成DNA损伤,从而引起基因突变。此外,过多的iNOS也能抑制肿瘤细胞凋亡。在本实验中在非癌组织中未见iNOS表达,胃癌中iNOS的阳性表达率为64.29%,在高、中分化腺癌中iNOS表达为46.67%;在低分化腺癌iNOS表达为77.50%,低分化腺癌中的表达率明显高于高、中分化腺癌,表明iNOS除了在胃癌的发生过程中起重要作用外,其与肿瘤分化程度的关系也相当密切,检测其的表达对临床推测胃癌的发生及预后有重要价值。
, 百拇医药
    IL-8是一种多功能细胞因子,可由包括肿瘤细胞在内的多种细胞分泌,在肿瘤的发生、发展与转移中起重要作用。人们已经在许多肿瘤组织如肝癌、膀胱癌等中检测到IL-8的表达,但关于IL-8在胃癌组织中表达的报道少见。在本实验中IL-8在非癌组织中(包括癌旁组织及正常组织)的表达率与癌组织中的表达率有显著性差异,非癌组织中的表达率低于癌组织中的表达率,但在高、中分化腺癌和低分化腺癌中,IL-8表达率没有显著性差异,说明IL-8只在在胃癌发生起始阶段,即在萎缩性胃炎到肠上皮化生和不典型增生的过程中发挥了作用,但在肿瘤演进和异质化过程中IL-8并不参与,当然,这只是一种猜测,有待于更细致准确的实验技术的验证和支持。本实验提示iNOS和IL-8在胃癌的发生中可能发挥重要作用,两者可能共同参与胃癌发生的起始阶段。因此联合抑制iNOS和IL-8的活性可能在肿瘤的防治中发挥巨大的作用。, http://www.100md.com(高 峰 昊德全)