麻杏石甘汤平喘机理的实验研究(1)
【摘要】 目的 了解麻杏石甘汤对Th1 、Th2细胞因子的影响，进一步探讨麻杏石甘汤治疗哮喘的机制。方法 50只雌性BALB/c 6~8固龄小鼠(18～22 g)随机5组。卵蛋白(OVA)腹腔注射与雾化吸入诱发哮喘发作。采集外周血、肺泡灌洗液(BALF)，采用ELISA法检测IL-4、IFN-r、IL-12、IL-18水平变化。结果 与正常组相比，模型组IL-4水平明显升高(P[1-2]，氢氧化铝20 mg/只为
佐剂。7 d后，5%OVA超声雾化30 min连续12 d。每次激发哮喘前1 h，B、C、D、E组小鼠分别给予生理盐水0.5 ml；麻杏石甘汤(1.02 g生药/ml 0.5 ml)；地塞米松(0.18 mg/ml)0.5 ml；麻杏石甘汤(0.51 g生药/ml )0.25 ml和地塞米松(0.18 mg/ml)0.5、0.25 ml灌胃；A组用生理盐水代替抗原液进行腹腔注射、雾化吸入和灌胃，用量和时间与其他组完全相同。
1.3.2 外周血、BALF收集与处理 末次激发后48 h后[3-4]，摘除小鼠眼球取血1.0 ml,注入含有40 μl肝素的抗凝试管中，1 500 r/min离心10 min后取上清液约0.5 ml保存于-80℃冰箱中备测。将取血后的小鼠固定于手术板上，暴露气管后，在第二、三软骨环间剪一小口，将尖端磨平的7号针头进针0.5~1.0 cm,以0-0手术线结扎固定，用1 ml 注射器，每次抽取生理盐水0.8 ml(0℃～4℃预冷)，注入小鼠支气管中缓慢回抽3次，进行4次灌洗，共约2.5 ml的灌洗液注入冰冻管中，1 500 r/min离心10 min后取上清液约2.0 ml保存于-80℃冰箱中备测。
1.3.3 外周血、BALF中IL-4、IFN-r、IL-12、IL-18测定 采用小鼠IL-4、IFN-r、IL-12、IL-18ELISA检测试剂盒，按试剂盒说明书进行操作。
1.3.4 统计学处理 实验数据采用SPSS10.0软件进行统计，P[4-5]。Th2细胞主要产生IL-4、IL-5等。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ等。通过观察各组小鼠肺泡灌洗液及外周血浆IL-4和IFN-γ 浓度，及IFN-γ/IL-4比值, 与哮喘组比较，发现这些药物均能显著减少哮喘小鼠IL-4浓度(P, http://www.100md.com(陈 娜 李红兵)
佐剂。7 d后，5%OVA超声雾化30 min连续12 d。每次激发哮喘前1 h，B、C、D、E组小鼠分别给予生理盐水0.5 ml；麻杏石甘汤(1.02 g生药/ml 0.5 ml)；地塞米松(0.18 mg/ml)0.5 ml；麻杏石甘汤(0.51 g生药/ml )0.25 ml和地塞米松(0.18 mg/ml)0.5、0.25 ml灌胃；A组用生理盐水代替抗原液进行腹腔注射、雾化吸入和灌胃，用量和时间与其他组完全相同。
1.3.2 外周血、BALF收集与处理 末次激发后48 h后[3-4]，摘除小鼠眼球取血1.0 ml,注入含有40 μl肝素的抗凝试管中，1 500 r/min离心10 min后取上清液约0.5 ml保存于-80℃冰箱中备测。将取血后的小鼠固定于手术板上，暴露气管后，在第二、三软骨环间剪一小口，将尖端磨平的7号针头进针0.5~1.0 cm,以0-0手术线结扎固定，用1 ml 注射器，每次抽取生理盐水0.8 ml(0℃～4℃预冷)，注入小鼠支气管中缓慢回抽3次，进行4次灌洗，共约2.5 ml的灌洗液注入冰冻管中，1 500 r/min离心10 min后取上清液约2.0 ml保存于-80℃冰箱中备测。
1.3.3 外周血、BALF中IL-4、IFN-r、IL-12、IL-18测定 采用小鼠IL-4、IFN-r、IL-12、IL-18ELISA检测试剂盒，按试剂盒说明书进行操作。
1.3.4 统计学处理 实验数据采用SPSS10.0软件进行统计，P[4-5]。Th2细胞主要产生IL-4、IL-5等。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ等。通过观察各组小鼠肺泡灌洗液及外周血浆IL-4和IFN-γ 浓度，及IFN-γ/IL-4比值, 与哮喘组比较，发现这些药物均能显著减少哮喘小鼠IL-4浓度(P, http://www.100md.com(陈 娜 李红兵)