腺苷酸环化酶及蛋白激酶A在β受体激动增加eNOS活性信号通路中的作用(1)
【摘要】 目的 阐明β受体激动增加内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性信号通路中腺苷酸环化酶(AC)及蛋白激酶A(PKA)的作用。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞；运用同位素两步色谱法([3H]-L-精氨酸转化法)检测eNOS活性。本研究设置空白对照组、AC组和PKA组，每组因素下再分ISO及BSS两个干预因素组，观察AC特异性阻断剂SQ-2256(5×10-5mol/L)及PKA特异性阻断剂H-89(1×10-7mol/L)分别与人脐静脉内皮细胞孵育10 min，再与异丙肾上腺素(ISO)孵育30 min后eNOS活性变化。结果 ISO明显增加eNOS活性(30.7±3.9)%,P-5mol/L,AC inhibitor)and H-89(1 10-7mol/L,PKA inhibitor)separately for 10 min,then agonist isoprenaline(1 10-6 mol/L)or vehicle was added and the incubation continued for another 30 min； Evaluation of NOS activity was determined by the conversion of L-[3H]arginine to L-[3H]citrulline.Results Isoprenaline increased [3H] L-citrulline formation by(30.7±3.9)%(P[1-4] ......
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