丙丁酚对高脂血症小鼠表达C反应蛋白的影响(1)
【摘要】 目的 观察丙丁酚对高脂高胆固醇饲养的高脂血症小鼠体内C反应蛋白(CRP)活性及表达的影响，探讨丙丁酚的作用机制。方法 以高脂高胆固醇饲料饲喂小鼠，制作高脂血症模型。HE染色观察小鼠肝脏病变情况；采用相关检测试剂盒测定小鼠血脂水平、血浆中CRP和谷胱甘肽S转移酶的活性；采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏CRP mRNA的表达。结果 高脂高胆固醇饮食显著增加C57BL/6J和apoE-/-小鼠血脂水平(P[1-2]。本研究以高脂高胆固醇饮食饲喂apoE基因敲除小鼠(apolipoprotein E knockout mice,apoE-/-)及其遗传背景相同的C57BL/6J 小鼠，观察丙丁酚对高脂血症小鼠血浆CRP活性及肝脏CRP表达的改变，探讨高脂血症小鼠肝脏损伤状况及丙丁酚的可能作用。
1 材料与方法
1.1 动物和主要试剂 apoE-/-小鼠、C57BL/6J小鼠及小鼠标准饲料均购自北京大学医学部实验动物部；丙丁酚由北京维信康医药有限公司提供；血脂检测试剂盒均购自中生北控生物技术公司；Trizol试剂盒购自美国Invitrogen公司；Reverse Transcription System购自美国Promega公司；CRP及GAPDH上、下游引物序列由上海生工生物工程技术服务有限公司合成；2×Taq PCR MasterMix 及100 bp DNA Ladder购自天根生化科技(北京)有限公司；Agarose，购自西班牙Biowest公司；其它试剂均为国产分析纯。
1.2 动物分组及饲养方法 饲喂小鼠的基础饲料即小鼠标准饲料(normal diet,ND)，高脂高胆固醇(high fat and high cholesterol,HFHC)饲料，即小鼠基础饲料+15%猪油+0.25%胆固醇。实验用60只雄性小鼠(其中apoE-/-小鼠和C57BL/6J小鼠各30只)均饲养在SPF级实验动物房中，予以高脂高胆固醇饲料饲养至实验结束。随机将两种小鼠各分为3组，每组10只。分组如下。, http://www.100md.com(叶延平 李 良 莫中成 龙治峰 石金凤 尹小波 李 霞 易光)
1 材料与方法
1.1 动物和主要试剂 apoE-/-小鼠、C57BL/6J小鼠及小鼠标准饲料均购自北京大学医学部实验动物部；丙丁酚由北京维信康医药有限公司提供；血脂检测试剂盒均购自中生北控生物技术公司；Trizol试剂盒购自美国Invitrogen公司；Reverse Transcription System购自美国Promega公司；CRP及GAPDH上、下游引物序列由上海生工生物工程技术服务有限公司合成；2×Taq PCR MasterMix 及100 bp DNA Ladder购自天根生化科技(北京)有限公司；Agarose，购自西班牙Biowest公司；其它试剂均为国产分析纯。
1.2 动物分组及饲养方法 饲喂小鼠的基础饲料即小鼠标准饲料(normal diet,ND)，高脂高胆固醇(high fat and high cholesterol,HFHC)饲料，即小鼠基础饲料+15%猪油+0.25%胆固醇。实验用60只雄性小鼠(其中apoE-/-小鼠和C57BL/6J小鼠各30只)均饲养在SPF级实验动物房中，予以高脂高胆固醇饲料饲养至实验结束。随机将两种小鼠各分为3组，每组10只。分组如下。, http://www.100md.com(叶延平 李 良 莫中成 龙治峰 石金凤 尹小波 李 霞 易光)