新脱蜡方法和胶片在免疫组化染色中的应用
【关键词】免疫组化; 病理技术
在免疫组化染色过程中，组织切片，特别是经酶消化后的切片，长时间浸泡在水溶性试剂内多次振荡冲洗，与玻片粘附性降低，常造成脱片。另外在每次加抗体前要用缓冲液冲洗，以致缓冲液弥漫于玻片，为防止抗体四溢和被稀释，必须擦掉组织周边的缓冲液，费时费力。为此，作者改用白乳胶作为切片粘附剂防止脱片和改变脱蜡方法，可以基本上不经擦水直接滴加试剂染色，取得满意效果。方法如下。
1 材料与方法
1.1 粘附剂的改进用戴乳胶手套的手指蘸市售白乳胶和水(约1：1)少许，反复涂抹于洁净玻片一端，直至白乳胶均匀一致，晾干，备用。
1.2 脱蜡方法的改进直接从烤箱取出的切片脱蜡时间不超过l 0 min，室温备用切片脱蜡时间不超过15 min，均在15℃环境脱蜡，脱蜡终点以切片入水后观察切片组织有水湿润而周边无水附着为佳;或在切片周余蜡多时，用吸管吸二甲苯搜盖组织片，尽量不滥于蜡片上脱蜡。
2 讨论
目前多用明胶中加甘油、甲醛或铬明矾配制的粘附剂及多聚赖氨酸等来防止脱片。实际染色中明胶类粘附剂效果并不理想，尤其在经酶消化组织切片后，明胶同时被消化而失去粘附作用，多聚赖氨酸价格昂贵且不易买到。改用白乳胶作粘附剂，在各种免疫组化染色中均获满意效果。但在涂于玻片时切忌贪多厚涂，否则造成切片透光度差，复染后背景不清。
利用切片上组织和其四周蜡片中蜡含量不同缩短脱蜡时间，使得蜡在组织片上全部脱掉而其周边尚余部分，入水后的切片由于组织部分亲水而余蜡部分疏水，可以不经擦水直接滴加试剂进行染色，省时省力。脱蜡时间不宜过长更忌太短，否则蜡脱不净染不上色。把握不准脱蜡时间时，可将短时间脱蜡的切片先染苏木素，若胞核着色良好，即为脱蜡彻底。当切片数量少，时间充裕时，对组织片周边余蜡多的切片可用吸管滴二甲苯于组织片充分脱蜡后进行染色。, 百拇医药(薛晓冬 王 尧 于秀冰 胡 平)
在免疫组化染色过程中，组织切片，特别是经酶消化后的切片，长时间浸泡在水溶性试剂内多次振荡冲洗，与玻片粘附性降低，常造成脱片。另外在每次加抗体前要用缓冲液冲洗，以致缓冲液弥漫于玻片，为防止抗体四溢和被稀释，必须擦掉组织周边的缓冲液，费时费力。为此，作者改用白乳胶作为切片粘附剂防止脱片和改变脱蜡方法，可以基本上不经擦水直接滴加试剂染色，取得满意效果。方法如下。
1 材料与方法
1.1 粘附剂的改进用戴乳胶手套的手指蘸市售白乳胶和水(约1：1)少许，反复涂抹于洁净玻片一端，直至白乳胶均匀一致，晾干，备用。
1.2 脱蜡方法的改进直接从烤箱取出的切片脱蜡时间不超过l 0 min，室温备用切片脱蜡时间不超过15 min，均在15℃环境脱蜡，脱蜡终点以切片入水后观察切片组织有水湿润而周边无水附着为佳;或在切片周余蜡多时，用吸管吸二甲苯搜盖组织片，尽量不滥于蜡片上脱蜡。
2 讨论
目前多用明胶中加甘油、甲醛或铬明矾配制的粘附剂及多聚赖氨酸等来防止脱片。实际染色中明胶类粘附剂效果并不理想，尤其在经酶消化组织切片后，明胶同时被消化而失去粘附作用，多聚赖氨酸价格昂贵且不易买到。改用白乳胶作粘附剂，在各种免疫组化染色中均获满意效果。但在涂于玻片时切忌贪多厚涂，否则造成切片透光度差，复染后背景不清。
利用切片上组织和其四周蜡片中蜡含量不同缩短脱蜡时间，使得蜡在组织片上全部脱掉而其周边尚余部分，入水后的切片由于组织部分亲水而余蜡部分疏水，可以不经擦水直接滴加试剂进行染色，省时省力。脱蜡时间不宜过长更忌太短，否则蜡脱不净染不上色。把握不准脱蜡时间时，可将短时间脱蜡的切片先染苏木素，若胞核着色良好，即为脱蜡彻底。当切片数量少，时间充裕时，对组织片周边余蜡多的切片可用吸管滴二甲苯于组织片充分脱蜡后进行染色。, 百拇医药(薛晓冬 王 尧 于秀冰 胡 平)