1.2.3 MTT比色法检测细胞活力 以1×10⁴/孔的密度，将RF/6A接种于96孔板，每孔200 μl。培养至1、3、5、7 d时用0.25%胰蛋白酶/0.02%EDTA消化细胞，制成细胞悬液，与浓度为0.4%的台盼蓝溶液按照1:1比例混匀，室温下作用3 min后，于15 min内于血球记数板上计数呈蓝色细胞。根据下式计算细胞活力：(总细胞数-着色细胞数)/总细胞数×100%。

    1.2.4 western-blotting检测survivin表达 实验组细胞培养5 d，去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍，加入裂解液后置于冰上15 min，以细胞刮收集细胞于EP管，超声(200 W)3 s×2次裂解细胞。以12 000 g，4℃离心2 min。取少量上清液进行定量，以牛血清蛋白(BSA)为标准品，采用考马斯亮蓝法，于酶标仪490 nm下测定光密度值(OD值)，计算提取总蛋白的浓度，将所有蛋白样品调至等浓度上样(上样前100℃水浴3 min) ......