靶向survivin的siRNA对肝癌HepG2细胞增殖和转移能力的影响

http://www.100md.com 2009年7月5日 麻　晓　荆晓岳　王　利

第1页

    参见附件(2216KB，3页)。

    麻晓 荆晓岳 王利 漯河市中医院外科;新乡医学院第一附属医院普外科;

    【摘要】目的探讨针对人survivin基因的siRNA对肝癌细胞HepG2的体内外抑制作用。方法合成survivin基因的RNA干涉(RNA interferance,RNAi)特异性片段,构建survivin特异性的RNA干涉载体pSiS,转染HepG2细胞,G418筛选稳定转染的细胞系。细胞计数检测细胞生长情况;Western blot-ting检测细胞中survivin蛋白表达的变化;通过AnnexinV法染色和流式细胞术检测细胞凋亡;观察裸鼠皮下HepG2移植瘤的形成。结果成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体pSiS,获得了稳定转染的细胞HepG2/pSiS。与HepG2、HepG2/pSi(空质粒对照细胞)相比,HepG2/pSiS细胞生长曲线十分平缓,差异有统计学意义(P0.01);Western blotting显示,HepG2/pSiS细胞中survivin蛋白表达减少,细胞凋亡率增加(P0.01)。HepG2/pSiS移植瘤形成明显受到抑制。结论Survivin特异性siRNA可明显促进肝癌细胞HepG2的凋亡,抑制该肿瘤细胞体外生长和体内移植成瘤。

    【关键词】 肝癌 survivin RNA干涉 凋亡 抗肿瘤

    【分类号】R735.7

    肝癌是人类常见的原发性恶性肿瘤,目前对肝癌采取的治疗手段主要是手术和化疗,治疗效果依然不能令人满意。由于其早期的复发和转移,患者大部分预后不良。对于肝癌细胞的研究表明,有一系列的基因功能的改变促进了肿瘤的增殖与侵袭。Survivin是1997年发现的一个凋亡抑制基因,属
------
     [摘要] 目的 探讨针对人survivin基因的siRNA对肝癌细胞HepG2的体内外抑制作用。方法 合成survivin基因的RNA干涉(RNA intefferance，RNAi)特异性片段，构建survivin特异性的RNA干涉载体pSiS，转染HepG2细胞，G418筛选稳定转染的细胞系。细胞计数检测细胞生长情况；western blot-ting检测细胞中survivin蛋白表达的变化；通过AnnexinV法染色和流式细胞术检测细胞凋亡；观察裸鼠皮下HepG2移植瘤的形成。

    http://www.100md.com/html/paper/1673-7555/2009/19/41.htm

您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2216KB，3页)。