ERK信号转导途径在小檗碱抑制脂多糖诱导的COX-2表达中的作用(3)
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在不同的作用时间段(30 min,6 h,12 h,24 h),与脂多糖组相比,在给药后30 min,ERK蛋白活性表达无统计学差异。在其他时间(6 h,12 h,24 h),ERK蛋白活性表达明显减低,具有统计学意义。且在给药后12 h, ERK蛋白活性表达水平降至最低(P<0.01, 见图3)。
图3 (A, B)在人外周血单核细胞给予或不给予小檗碱后12 h,ERK及p-ERK蛋白表达的显影图片。(C) 给予小檗碱不同的浓度后在不同的时间段ERK活性蛋白表达半定量平均值的比较。
M: 蛋白marker; C: 对照组; L: LPS 组; B+: LPS+ BBR 25μmol/L组; B++: LPS+ BBR 50μmol/L组; B+++: LPS+ BBR 100μmol/L组
2.4 ERK特异性抑制剂对 COX-2 mRNA 和蛋白表达的影响 在给予ERK特异性抑制剂之后,与脂多糖组相比,不管是COX-2 mRNA表达,还是COX-2蛋白表达均受到明显抑制(P<0.05,见表1,2)。
表1
加入特异性ERK抑制剂后,以RT-PCR 检测COX-2 mRNA 表达
分组样本 对照组 LPS组LPS+PD98050 组
12 hour 6 0.368±0.1231.662±0.321 1.130±0.147a
所有均值以均数±标准差(x±s)表示,(n=6),a: 与 LPS组比较,P<0.05 ,有统计学意义。
表2
加入特异性ERK抑制剂后,以westernblot 法检测COX-2/GAPDH 蛋白表达
分组样本对照组LPS组LPS+PD98050组
12 hour 61.370±0.1422.495±0.4961.730±0.432a
所有均值以均数±标准差(x±s)表示 (n=6)。a: 与 LPS组比较,P<0.05 ,有统计学意义 ......
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