肾活检标本的冰冻切片直接免疫荧光法中冰冻切片对包埋剂的选择及应用
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【关键词】 包埋剂;肾活检标本;冰冻切片直接免疫荧光检查;冰冻切片;胶水
肾脏疾病中,变态反应在其病因发病机制中占很大比重,所以在肾活检标本中显示抗原或抗体是很重要的,一般使用冰冻切片直接免疫荧光法观察切片标本上荧光抗体染色结果作为抗原的鉴定和定位。冰冻切片直接免疫荧光法要求冰冻切片质量优良,制作一张质量优良的冰冻切片,制片过程中的每一步环节都很重要,其中包埋剂的使用也很关键,包埋剂包埋组织(-20℃~25℃)冷冻后对组织起到支托固定的作用。现工作中制作冰冻切片常用包埋剂是OCT,在多年临床工作中,我科使用普通胶水替代OCT包埋,所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查与使用OCT包埋剂所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查效果相同。
1 材料与方法
1.1 材料 肾活检标本,普通胶水(把胶水装入用完的OCT包埋剂的空瓶中),冰冻托盘架置于(-20℃~25℃)冰冻切片机箱体中待用,载玻片、荧光抗体(兔抗人IgA、兔抗人IgG、兔抗人IgM、兔抗人C1q、兔抗人C3)抗体为丹麦DAKO公司产品,PBS,缓冲甘油等。
1.2 方法 将肾活检组织取材后放置到待用的托盘架正中位置上(由于肾活检组织小,托盘架要做底座,用胶水替代OCT做底座),用胶水替代OCT将组织块完全包埋 ......
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