en橙皮甙对H2O2诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响(2)
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图1 心肌细胞免疫组化染色×400
图2 对照组×400
图3 H2O2 作用4 h组×400
3 讨论
活性氧自由基是心脏疾病发生及诱导心肌细胞死亡的主要因素之一,H2O2是体内氧化还原代谢的中间产物,同时又是一种ROS,当它在体内积累到一定程度可对机体细胞产生损伤作用。目前已有实验证明H2O2可以诱导心肌细胞凋亡[5]。本实验用MTT法对橙皮甙在10-8~10-4 mmol/L的浓度范围内进行药物毒性筛选,结果表明在该浓度范围内橙皮甙对培养的心肌细胞无毒性作用,用终末浓度为4.41 mmol/L的H2O2诱导心肌细胞凋亡,凋亡指数(AI)与H2O2诱导时间呈依赖关系。在建立H2O2诱导心肌细胞凋亡模型的基础上,分别加入低(10-8 mmol/L)、中(10-5 mmol/L)、高(10-3 mmol/L)不同浓度的橙皮甙作用,经用Tunel法检测细胞凋亡情况,结果显示与模型组比较有统计学差异(P<0.01),提示在设立的浓度范围内,橙皮甙对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有拮抗作用,但这种作用是通过消除氧自由基的产生,还是通过其它机制减轻H2O2对心肌细胞的损害,还有待进一步的探索。本实验中橙皮甙的量效关系及时效关系尚未显示有明显规律,推测可能与橙皮甙作用浓度的选择或作用时间不够理想有关,还需进一步研究。
参 考 文 献
[1] 娄桂予,江渝,彭家和,等.橙皮甙抗LDL氧化及对MCP21mRNA转录的影响.第三军医大学学报,2004 ,26(8):717-719.
[2] 娄桂予,钱民章.橙皮甙、芦丁抗家兔动脉粥样硬化及对单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的影响.中国动脉硬化杂志(会议专辑),2002,10(39):1-4.
[3] 秦得安,苏丹,王晓玲,等.橙皮苷对羟自由基的清除作用.中国药学杂志,1996,31(7):396-398.
[4] Zhang CY,Qu Sp,Hu GB.A modified method of flurescent staining for the apoptosis detection from blood tumor cells.Cancer Res Prev Treat,1998,5(6):432-436.
[5] Mohammad NS,KirstenM,Odd B.Effect of hydrogen peroxide on reocygenation-induced Ca2+ accumulation in rat cardiomyocytes.Free Radi.B iol &M ed,2004,37(4):531-538.
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