两种土荆皮习用药材提取物体外抗真菌活性研究(2)
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2.4 菌液接种 对照管和试验管每管均用划线法接种1白金耳，置28℃恒温箱中培养，每日观察实验结果。
2.5 杀菌试验 将上述培养未生长的菌落接种至液体培养基，继续孵育12 d，每天观察实验结果。
3 实验结果
判断标准：以有无菌生长为判断标准，与阴性对照组(菌落生长正常)比较，有肉眼可见菌落生长者为无抑菌作用，无菌落生长者的药物最低浓度为药物的最低抑菌浓度(MIC)。
药基法观察结果:阴性对照组试管均在接种1~3 d后菌落开始正常生长，水翁皮1、水翁皮2及余甘子皮含药基试管与对照组相比无明显的抑制生长效果，对11菌种MIC均>50 μl/ml。土荆皮有较强的抑菌活性，除对武汉须毛癣菌、武汉近平滑念珠菌的MIC为3.13 μl/ml外，其余菌株均为6.25 μl/ml。阳性对照药达克宁对11株皮肤癣菌株均表现出显著抑菌活性， MIC均<0.78 μl/ml，结果见表1。
杀菌实验结果:含达克宁药基接种到液体培养基后，再培养的菌落，生长十分缓慢，说明达克宁有明显的抑菌作用，观察12 d后，液体培养基中仍无真菌生长的浓度判断为药物的MFC，达克宁MFC<0.78 μl/ml。土荆皮除对武汉须毛癣菌、武汉近平滑念珠菌的MFC为3.13 μl/ml外，其余菌株均为6.25 μl/ml，说明土荆皮对上述真菌的作用为杀菌活性。结果见表2。
4 讨论
土荆皮又名土槿皮、金钱松、水松皮、荆树皮，为松科植物金钱松(Pseudolarix kaempferi Gord)的干燥根皮或近根树皮[2]，为《中华人民共和国药典》收载的常用中药，性温，味辛；有毒，有杀虫、止痒作用，常用于疥癣瘙痒。其中含有二萜类、三萜类、三萜内酯及甾醇类等成分,具有强烈的抗真菌、抗肿瘤作用[3,4],其应用前景广阔,但当前有限的植物资源已成为开发其活性产物的巨大障碍。
金钱松(Pseudolarix kameferi Gord)是我国特有的著名古老孑遗松(Pinaceae)树种，大约起源于白垩纪中晚期，曾广泛分布于北纬33°~52°地区[5]。在更新世大冰期后，各地金钱松相继灭绝，只有在长江中下游地区幸存下来,现在正处于濒危状态，已被列为国家二级保护植物[6，7]。该树种的根皮和近根皮部分被称为土荆皮，在我国民间作为中药入药已有悠久的历史。
水翁皮，为桃金娘科水翁Cleistocalyx operculatus (Roxb.) Merr. Et Perry的干燥树皮，味辛，性温，有止痒，杀虫功效，可用于癣癞，阴囊瘙痒，脚癣，皮肤瘙痒等。据文献报道，广东习用其作土荆皮入药。据考证，广东在清代(公元1711年)已开始应用，用于杀虫，治癣。疗效可靠，与正品相仿。为了与正品区别，可称为广东土荆皮入药[8]。
余甘子皮是大戟科叶下珠属落叶乔木余甘子(Phyllanthus emblica L.)的树皮，分布于我国的福建、广东、广西、云南等省及东南亚、印度等地。经研究发现，主要含酚性成分、有机酸、还原糖、多糖、黄酮类、类酯与香豆精、植物甾醇、三萜、挥发油等，果仁中还含有不饱和脂肪酸。全世界有17个国家或民族在自己的传统药中使用余甘子[9]。
目前国内市场上土荆皮的代用药材十分混乱，主要流行的土荆皮习用药材主要为水翁皮[8]、紫荆皮[10，11]、余甘子皮[12]。由于来源科属不同，功能主治互有差别，亟待统一标准，正本清源，以达到一药一名，规范用药。建议国家药典委员会尽快制定质量标准。临床医生及药房工作人员在使用土荆皮时，在质量标准未统一的情况下， 应详细了解本地的使用习惯，以期正确使用和鉴别土荆皮。
水翁皮与余甘子皮作为土荆皮入药，是否同土荆皮一样具有抗真菌活性，目前未见有实验室报道。在我们的研究结果中，水翁皮和余甘子皮提取物并没有体现出体外抗真菌活性，因此在临床使用中，作为土荆皮的习用药材，水翁皮和余甘子皮用治癣类等真菌感染所致皮肤类疾病，可能并不具有土荆皮同样的疗效，此研究结果对土荆皮的临床使用有一定的提示。
参考文献
[1] 宋永锋,陈虹,李灵芝.土荆皮的研究进展.天津药学,2001，12,13(6)：9-10.
[2] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编.人民卫生出版社,1992:628.
[3] Chen K, Zhang YL, Li Z L,et al. St ructure and stereochemistry of pseudolarolide J,anovel nortriterpene lactone from pseudolarix kaemp feri. JNa Prod,1996,59 (12)：1200-1202.
[4] Li X C,Elsohly H N. Two auronols f rom Pseudolarixamabilis ......
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