RP-HPLC法测定注射用磷酸氟达拉滨中磷酸氟达拉滨的含量
 |
| 第1页 |
参见附件(1671KB，2页)。
【摘要】 目的 建立以反相高效液相色谱法测定注射用磷酸氟达拉滨中磷酸氟达拉滨含量的方法。方法 色谱柱为Agilnet XDB-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为0.008 mol/L磷酸二氢钾溶液∶乙腈=95∶5，流速为1.0 =ml/min，柱温为30 ℃，检测波长为261 nm。结果 磷酸氟达拉滨浓度在5~100 μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997)；平均回收率为99.6%，RSD=0.3%(n=9)。结论 本方法操作简便，测定结果准确、重现性好，可用于测定注射用磷酸氟达拉滨中磷酸氟达拉滨的含量。
【关键词】
磷酸氟达拉滨；反相高效液相色谱；含量测定
RP-HPLC method for the determination of fludarabine phosphate in fludarabine phosphate for injection
MO Jian, NING Wei-zhi,WU Xiu-rong, et al.
Guangdong Maoming Peoples Hospitalinstitutional pharmacy, Maoming 525000, China
【Abstract】 Objective To establish a method for the determination of fludarabine phosphate in fludarabine phosphate for injection by RP-HPLC. Methods Chromatography was performed onAgilnet XDB-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm). The mobile phase was0.008 mol/L monobasic potassium phosphate solution-Acetonitrile(95﹕5). The flow rate was 1.0 ml/min.Detective wavelength was 261 nm. Results The calibration curves of Fludarabine Phosphate is linear within the range of 5~100 μg/ml. The average recovery was 99.6% and RSD was 0.3%. Conclusion This method is easy to operate and has good accuracy and repeatability.It can be used for the quality control of Fludarabine Phosphate for injection.
【Key words】
Fludarabine Phosphate； RP-HPLC；Assay
磷酸氟达拉滨(Fludarabine Phosphate)是正常细胞内代谢产物单磷酸脱氧腺苷的细胞毒性类似物,是一种有效的抗癌药物,主要用于治疗B 细胞慢性淋巴细胞白血病，对其他白血病、淋巴瘤、实体瘤等也有效，其主要通过诱导细胞凋亡来杀伤细胞, 但具体的凋亡信号传导机制仍不很清楚[1-3]。本文建立采用RP-HPLC法测定注射用磷酸氟达拉滨中磷酸氟达拉滨含量的方法，本方法操作更简便、重现性好，可用于注射用磷酸氟达拉滨的质量控制。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters 2690高效液相色谱仪；Waters 2487紫外检测器；德国 SARTORIUS CP225电子天平。
1.2 试药 注射用磷酸氟达拉滨(广东岭南制药公司，批号：140035、080101；广州先灵药业有限公司，批号：140126)；磷酸氟达拉滨对照品(USP，CAT NO：1272204)；磷酸二氢钾(广州化学试剂厂)；乙腈为色谱纯，水为Milli-Q纯净水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 取磷酸氟达拉滨对照品适量，精密称定，加流动相制成浓度为0.1 mg/ml的溶液作为储备液。
2.2 供试品溶液的制备 取本品5瓶，将内容物混合均匀，精密称取适量(约相当于磷酸氟达拉滨50 mg)，用流动相稀释制成每1 ml约含20 μg磷酸氟达拉滨的溶液，即为供试品溶液。
2.3 阴性对照溶液的制备 称取注射用磷酸氟达拉滨辅料粉末，按“2.2”项下的制备方法处理得阴性对照溶液。
2.4 色谱条件及系统适用性试验 色谱柱：Agilnet XDB-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm),柱温：30℃。检测波长：261 nm。流动相为0.008 mol/L磷酸二氢钾溶液∶乙腈=95∶5，流速为1.0 ml/min。进样量20 μl, 理论板数(N)按磷酸氟达拉滨峰计算达3000，且与相邻杂质峰的分离度均符合要求，阴性样品不干扰样品的测定，如图1。
2.5 精密度试验 取对照品储备液，用流动相稀释成20 μg/ml，连续进样5次，记录峰面积，并计算5针磷酸氟达拉滨峰面积的RSD为0.3%，表明仪器精密度良好。
2.6 线性试验 取对照品储备液，用流动相稀释成浓度分别为5，10，20，50，100 μg/ml的溶液，进样20 μl，各2次以上。以峰面积(A)对浓度(C)进行回归，得磷酸氟达拉滨回归方程为A=97651C-60441，r＝0.9997，在0.005~0.1 mg/ml范围内有很好的线性关系。
2.7 稳定性试验 取供试品溶液于1、3、6、9、12、24 h分别进样20 μl，记录色谱图中磷酸氟达拉滨峰面积，结果磷酸氟达拉滨峰面积的RSD=0.8%。
2.8 重复性试验 取同一批号(080101)样品6份，制备供试品溶液，按本法测定，结果磷酸氟达拉滨的平均标示量为99.6%，RSD为0.7%。
2.9 回收率试验 取已测定含量的注射用磷酸氟达拉滨供试品，精密称取已测定含量的注射用磷酸氟达拉滨细粉适量(约相当于磷酸氟达拉滨25 mg)9份，分别精密加入磷酸氟达拉滨对照品约20、25、30 mg，照供试品溶液制备方法，并用流动相稀释至一定浓度，分别进样，结果如表1。
2.10 耐用性试验
取对线性试验项下的对照品溶液，分别用Ultimate XB-C18柱(150 mm×4 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1671KB，2页)。