铜绿假单胞菌感染及多重耐药性分析检测
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【摘要】 目的 分析铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶及其耐药性的变化。方法 对各种标本采集到的726株铜绿假单胞菌检测产诱导型β-内酰胺酶和对18种抗生素的耐药性进行分析。结果 726株铜绿假单胞菌对18种抗生素的耐药性由低到高为舒巴坦(5.4%)、阿米卡星(12.4%)、美罗培南(18.1%)、亚胺培南(19.5%)、头孢吡肟(21.4%)、头孢曲松(24.5%)、头孢噻肟(26.5%)、头孢他啶(28.4%)、头孢哌酮(30.5%)、庆大霉素(31.9%)、左氧氟沙星(40.7%)、环丙沙星(42.5%)、氧氟沙星(44.6%)、哌拉西林(45.4%)、头孢呋辛钠(57.2%)、头孢唑啉(57.2%)、羟苄西林(67.1%)、复方新诺明(81.2%)。726株铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶者538(占74.1%)，产诱导型β-内酰胺酶株对舒巴坦、阿米卡星、美罗培南、亚胺培南等抗生素的耐药性明显高于不产诱导型β-内酰胺酶株。结论 产诱导型β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的耐药性明显高于不产酶的菌株，临床应联合使用抗生素以减少耐药性的产生。
【关键词】诱导型；β-内酰胺酶；抗生素；耐药性
铜绿假单胞菌是临床上最常见的一种能引起严重院内感染的条件致病菌，已占重病监护室病房(ICU)及呼吸科革兰氏阴性菌感染前几位[1]，其致病性与其特殊的耐药机制有关，随着广谱抗生素的广泛应用，引起该菌株耐药性增加，由该菌株引起的感染越来越严重。为了了解大连市第二人民医院近几年由临床各科(主要来自呼吸科及重症监护病房)分离的726株铜绿假单胞菌对18种抗生素的耐药性以及对铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶状况的了解，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 菌株来源 2008到2010年本院门诊及病房住院患者的血、尿、便、痰、脓液及各种引流液、穿刺液等标本分离的铜绿假单胞菌726株。其中痰液604株，尿液64株，伤口分泌物25株，咽拭子15株，血液10株，穿刺液及引流液8株。
1.2 试剂和仪器 美国产Micro Scan WalkAway-40型微生物分析仪及其鉴定板，鉴定板上有20种抗生素的不同最低抑菌(MIC)浓度，没有的抗生素由传统的K-B纸片法鉴定。
1.3 药敏试验 采用MIC法和K-B纸片法，药敏结果判定以CLSI2006年“MIC法药敏试验操作标准”判定MIC值大小，而K-B纸片法按照标准操作手册判定结果，并应用铜绿假单胞菌(ATCC27853)进行质控。
1.4 诱导型β-内酰胺酶检测符合CLSI2006标准的VerSion22分析软件对待测菌株自动检测诱导型β-内酰胺酶结果
2 结果
2.1 726株铜绿假单胞菌对18种抗生素耐药性的分析结果见表1。
表1
726株铜绿假单胞对18种抗生素耐药性的分析
抗生素名称耐药菌株耐药率(%)
舒巴坦395.4
阿米卡星9012.4
美罗培南13118.1
亚胺培南14219.5
头孢比肟15521.4
头孢曲松17824.5
头孢噻肟19226.5
头孢他啶20628.4
头孢哌酮22230.5
庆大霉素23231.9
左氧氟沙星29540.7
环丙沙星30942.5
氧氟沙星32544.8
哌拉西林33045.4
头孢呋辛钠41557.5
头孢唑啉41557.2
羟苄西林48767.1
复方新诺明58981.2
2.2 铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶检出及耐药情况
726株铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶者538，占74.1%，不产诱导型β-内酰胺酶者188，占25.9%，符合报告[2]。在产诱导型β-内酰胺酶中舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林诱导铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶的出现率为67.0%到89.3%。
2.3 在铜绿假单胞菌的耐药性分析中，常出现一种耐药性变化情况，有少量患者在入院时检测铜绿假单胞菌不产诱导型β-内酰胺酶，但是经过一段时间的治疗后，变成产诱导型β-内酰胺酶，特别是对舒巴坦、美罗培南、亚胺培南的耐药更值得高度重视。
3 讨论
3.1 铜绿假单胞菌在自然界中广泛存在，做为机会致病菌，该菌是医院感染的主要病原菌之一，铜绿假单胞菌在ICU病房感染率最高，其次为呼吸科、外科感染，但其不排除院内的机会感染，尤其是ICU病房。
3.2 铜绿假单胞菌对多种抗生素耐药，主要与产生Ⅰ型诱导型头孢菌素酶(AmpC酶)[3]和其外膜通透性下降有关，其AmpC酶对β-内酰胺酶类抗生素广泛耐药，切不被克拉维酸所分解。铜绿假单胞菌在正常情况下，只产少量的AmpC酶，而当有诱导作用的β-内酰胺酶类抗生素存在的条件下，AmpC酶的产量可以明显增多。
3.3 铜绿假单胞菌对舒巴坦的耐药性最低，对阿米卡星、美罗培南、亚胺培南也有较低的耐药性，对头孢菌素及氨基糖苷抗生素的耐药性大大增加，对光谱青霉素普遍耐药，而对复方新诺明的耐药率更是达到81.2%。但是综合来看铜绿假单胞菌对各种抗生素的耐药越来越严重。
3.4 对铜绿假单胞菌在同一患者体内耐药性由无到有的变化 ......
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