自体间充质干细胞移植异体韧带重建治疗膝交叉韧带损伤(1)
 |
| 第1页 |
参见附件。
【摘要】 目的 探讨运用自体骨髓间充质干细胞移植配合同种异体髌腱重建前交叉韧带的临床疗效。方法 2009 年10月至2010年10月57例 ACL 损伤患者，随机分为实验组(n=31)及对照组(n=26)，移植物均采用同种异体骨-髌腱-骨。实验组在手术时配合运用骨髓间充质干细胞移植，于术后 3、6、12 个月进行随访，共52例患者完成随访，其中实验组28例，对照组24例。测量患者双膝关节活动度，并计算二者之差(健侧-患侧)，运用国际膝关节文献委员会(IKDC)评分以及 Lysholm 评分测评患者主观感觉状况。结果 术前上述数据在两组之间均没有统计学差异；术后两组患者一般情况均恢复良好，未发生严重并发症。在术后每个时间点两组患者的双膝活动度之差、 IKDC 评分及Lysholm 评分均较手术前明显好转，有统计学差异；实验组的IKDC 评分及Lysholm 评分在每个时间点较对照组表现出统计学意义(P<0.05)，但这种差异似乎有缩小的迹象；两组关节活动度之差在术后3、6个月时表现出了明显差异，但在术后 12 个月时差异消失了。结论 骨髓间充质干细胞移植配合同种异体骨-髌腱-骨移植重建 ACL 的临床早期效果明显优于单纯腱重建，说明骨髓间充质干细胞移植能在早期缩短移植物塑形改造时间，但其远期疗效仍有待研究。
【关键词】
骨髓间充质干细胞;前交叉韧带
前交叉韧带(anterior curiae ligament,ACL)在体育活动中极易损伤，其断裂后一般不能自发愈合，目前临床治疗的金标准是韧带重建术，但不管用什么移植材料只是起到模板作用，韧带移植物都要经历缺血坏死炎症期、再血管化过程、成纤维细胞增殖和植入期以及韧带的塑型改造期大致4个相连续的过程。移植物重塑改造的时间很长，有必要采取措施来加快这一进程。我院自2009年10月至2010年10月间运用自体骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)复合同种异体骨-髌腱-骨移植物重建受损的前交叉韧带，取得了满意的临床疗效，现报告如下。
1 临床资料
本组均为经过MRI检查、临床理学检查及关节镜检查证实为前交叉韧带完全断裂、同时排除了后交叉韧带损伤及内侧副韧带完全断裂的患者，且不伴有同侧肢体骨折、骨性关节炎等。2009年9月至2010年10月间，共57位患者按照随机数字分别纳入实验组和对照组进行手术治疗，出院后继续进行随访。
1.1 实验组 共31例，其中男18例，女13例；年龄19～52岁，中位年龄32.3岁。体重51～87 kg，平均63.4 kg；身高160～187 cm，平均167.9 cm。受伤因素：运动损伤11例，交通事故15例，高处摔伤5例，伤后到手术时间为3 d～22个月，中位病程10.8个月。
1.2 对照组 共26例，其中男15例，女11例；年龄18～55岁，中位年龄33.4岁。体重53～86 kg,平均65.1 kg；身高159～188 cm，平均168.7 cm。受伤原因：运动损伤8例，车辆撞伤13例，高处坠落伤5例，伤后到手术时间为7 d～23个月，中位病程11.2个月。
两组患者在性别、年龄、身高、体重、致伤原因等一般情况方面均无统计学意义。所有患者均有患膝关节不稳、疼痛、跛行、股四头肌萎缩致“打软腿”等症状。术前对患膝关节功能分别运用国际膝关节文献委员会(IKDC)评分及Lysholm评分进行评估，结果显示两组患膝关节功能评分均无明显统计学差异(见表1、2)
2 治疗方法
2.1 自体间充质干细胞培养
实验组无菌条件下在局麻下于两侧髂后上棘抽取骨髓60 ml，在200 g的条件下离心骨髓6 min，取上清液，加入等量PBS，在1000 g的条件下离心6 min，获取有核细胞。每平方厘米接种：大约0.8～1.2×106个有核细胞，在37℃、含20%自体PRP、5%CO2浓度下进行细胞培养，每隔3 d换液，细胞长满后，消化，冻存细胞备用。
2.2 移植物准备
先将同种异体髌骨-髌腱-胫骨(中国人民解放军骨科研究所组织库提供)制成骨-髌腱-骨复合体，近端骨块修剪成直径9 mm、长2 cm的骨柱，远端骨修剪成直径10 mm的全长骨柱。再分别在两端骨柱上间隔5 mm钻2个直径1.5 mm的骨孔，用肌腱线编织缝合髌腱并从骨孔引出。将干细胞悬液与透明质酸钠(山东博士伦福瑞达制药有限公司生产)以1:1的浓度混匀备用。将移植物和肌腱线在干细胞悬液中浸泡30 min；按每点0.1 ml多点均匀注入移植物内，再用肌腱线对移植物体部进行编织，最后在移植物表面均匀喷涂干细胞悬液与透明质酸钠混合物，透明质酸钠会逐渐固化附着于移植物表面，然后在工作台上进行预张，备用。
2.3 手术方法
采用硬膜外麻醉或全身麻醉，患者仰卧位，患肢下垂，健侧下肢放在支腿架上，患肢大腿根部扎气囊止血带。常规消毒铺单，前外侧入路进镜，关节镜下常规探查 ACL、后交叉韧带、半月板和软骨损伤情况。采用前内侧入路，处理合并伤，半月板损伤视情况行全切或次全切成型术，软骨损伤者行软骨成型术，用篮钳及刨削器清除原 ACL 及滑膜。
首先制备胫骨隧道：将胫骨导向器固定于 55° 位置上，经髌下内侧入口置入关节腔。将瞄准点定于原韧带胫骨残端中心位置，使胫骨隧道外口中心距关节面约3 cm。沿导向器钻入 1 根 2 mm 导针，分别用空心钻头和套筒钻作直径 20 mm 隧道，保留所获松质骨供胫骨隧道植骨用。最后修整打磨隧道以适应移植物胫骨附着点的解剖外形。后制备股骨隧道：膝关节屈曲 45°，推开后侧骨皮质的骨膜，通过胫骨隧道放入股骨导向器。再继续屈膝至 60 ～ 90°，检查胫骨隧道后缘是否有碰撞。沿导向器钻入 1 根 2 mm 导针。用空心钻头经导针在股骨钻孔，直径 20 mm，深 1.5 cm。刮匙和伞形刨削器打磨修整隧道，以适应移植物股骨附着解剖外形。保持屈膝 60°～90°，从胫骨隧道置入带槽导针，导针在隧道内的位置偏于胫骨隧道前内侧，并钻穿股骨穿出皮肤。将股骨端肌腱线系于带槽导针尾孔中，牵拉带槽导针，从大腿侧皮肤拉出，使移植物通过胫骨和股骨隧道。
在关节镜下用大小合适的生物界面可吸收螺钉挤压骨块固定；后在关节屈曲30°～40° 位，后压胫骨结节，拉紧胫骨端骨块牵引线，再根据患者骨质情况选用 1 枚与胫骨隧道直径相同或大1 mm 的生物界面螺钉固定胫骨侧骨块。将剩余干细胞悬液与透明质酸钠混液在关节镜下注入股骨与胫骨隧道内 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(6048kb)。