Annexin A2及CD105在胰腺导管腺癌中的表达及临床意义(2)
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1 资料与方法
1. 1 标本来源 于山西医科大学第一医院病理科选择51例胰腺癌组织标本及相应胰腺组织阴性切缘标本， 均使用10%中性福尔马林固定并石蜡包埋。所有病例均来源于2005～2010年， 其中男性24例， 女性27例， 年龄31～78岁， 中位年龄59.15岁。51例患者胰腺癌组织标本均经病理学诊断均为胰腺导管腺癌， 其中高分化腺癌(G1级)14例、中分化腺癌(G2级)6例、低分化腺癌(G3级)31例， 胰腺癌的TNM分期参照UICC2002年标准， Ⅰ～Ⅳ期分别为16例、7例、20例、8例。所有患者术前均未进行过放疗及化疗。
1. 2 实验试剂 兔抗人 Annexin A2多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司， 鼠抗人CD105单克隆抗体、兔抗及鼠抗免疫组化二步法试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1. 3 实验方法 Annexin A2、CD105蛋白检测采用免疫组化Power Vision 法， 操作按试剂盒说明书进行。标本常规石蜡包埋， 4 μm切片， 进行免疫组化染色。用已知阳性切片做阳性对照， PBS代替一抗为阴性对照。DAB染色后苏木素对比复染， 中性树胶封片。
1. 4 结果判定 Annexin A2蛋白表达情况结果判定标准为：胞浆或胞膜出现淡黄至棕黄或棕褐色颗粒为阳性细胞。按染色强度及阳性细胞数来计算评分：①染色强度：0分为阴性， 1分为淡黄色， 2分为黄色， 3分为棕黄色。②阳性细胞数：0分为无阳性细胞， 1分为阳性细胞数≤25%， 2分为阳性细胞数26%～50%， 3分为阳性细胞数≥51%。①+②之和即为最后得分， 0分为“0”， 1～2分为“1+”， 3～4分为“2+”， 5～6分为“3+”， “+”～“3+”判定为免疫组织化学染色阳性；CD105标志的微血管密度 (microvessel density， MVD)计数方法：先在低倍镜下(40X)选取微血管数量最丰富的3个区域 ......
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