孕激素介导uPA在卵巢癌治疗中的相关研究(1)
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【摘要】 目的 探讨孕激素介导uPA治疗卵巢癌的可能机制。方法 传代培养人卵巢癌细胞HO-8910， 应用Western blot方法检测对照组(未加孕激素组)和加入含有不同浓度孕激素培养液处理组， 作用72 h后对人卵巢癌细胞HO-8910 uPA表达的影响。结果 Western blot实验结果表明孕激素能够抑制uPA的表达， 呈浓度依赖性。结论 孕激素对卵巢癌细胞有抑制作用并且抑制人卵巢癌细胞uPA的表达， 提示孕激素用于卵巢癌的辅助治疗可能介导对uPA的影响起作用。
【关键词】 尿激酶型纤溶蛋白酶原激活剂；卵巢癌；孕激素；蛋白印记法
尿激酶型纤溶蛋白酶原激活系统(uPA系统)主要包括尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、uPA特异性受体(uPAR)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)。uPA能激活无活性纤维蛋白溶解酶原生成纤溶酶， 使纤维蛋白水解成可溶性肽类片段。纤维蛋白溶解参与肿瘤生长和肿瘤细胞的浸入过程， uPA调节细胞外基质蛋白的降解， 并能激活刺激肿瘤生长因子和其他蛋白酶[1]。肿瘤自身分泌的uPA可激活纤溶酶原为纤溶酶， 使基底膜裂开， 有利于肿瘤的侵袭和转移[2]。
有学者认为：孕激素抑制癌细胞是孕激素作用于癌细胞并与孕激素受体结合形成复合物进入细胞核， 延缓DNA和RNA复制， 抑制癌细胞生长[3]。但其确切机制， 仍不清楚。对于uPA在卵巢癌中的抗原表达及含量国外已有报道， 关于孕激素应用于卵巢癌的辅助治疗也有报道。但关于孕激素对卵巢癌细胞中uPA表达的影响目前尚无报道。本研究旨在应用 Western-blot法研究孕激素对人卵巢癌细胞中uPA表达的影响， 从而探讨孕激素在卵巢癌辅助治疗中的可能机制， 为临床治疗卵巢癌提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 细胞来源 卵巢浆液性囊腺癌细胞HO-8910(上海中科院细胞库)细胞形态及生物学特征均符合卵巢浆液性囊腺癌特征。
1. 1. 2 实验试剂
RPMI-1640培养液(大连晨玉)
胰酶 (大连晨玉)
Hepes(大连晨玉)
标准胎牛血清(大连博瑞德)
MTT(大连博瑞德)
uPA兔抗人多克隆抗体(北京博士德)
SP免疫试剂盒(北京中杉)
二甲基亚砜(大连诚锐)
蛋白印记试剂如：NC、丙烯酰胺、甲基双丙烯酰胺、Tris、甘氨酸、氯化钠、甲醇、冰乙酸、脱脂奶粉等(大连博瑞德)
耗材(沈联化学试剂玻璃仪器有限公司)
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