新城疫病毒作用下卵巢癌裸鼠移植瘤Survivin、Caspase-3的表达(2)
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1.5 统计学处理
采用SPSS14.0统计软件进行数据处理。NDV对卵巢癌裸鼠移植瘤Survivin、Caspase-3表达的影响采用秩和检验分析，P <0.05为差异显著。
2 结果
2.1 HE染色
实验组：癌细胞旁有凋亡细胞，体积缩小，核固缩。对照组： 细胞核大，不规则，染色质浓缩，形态多样，有20%的坏死区。
2.2 免疫组织化学
2.2.1 皮下移植瘤Caspase-3表达 Caspase-3阳性染色主要位于细胞浆，呈棕黄色。NDV组均阳性表达，对照组Caspase-3只有1例表达，且NDV组棕黄染色明显强于对照组，两组差异有显著性(P<0.05)。见图1、表1。
2.1.2 皮下移植瘤Survivin表达 Survivin阳性染色主要定位于细胞浆，也可见细胞核着色呈棕黄色，NDV组与对照组Survivin均为阳性表达，NDV组棕黄染色明显弱于对照组，差异有显著性(P<0.05)。见图2、3及表2。
3 讨论
新城疫病毒 (NDV) 为不分节段的单股负链RNA 病毒[1]，关于NDV 治疗肿瘤的机制，Siba等[2]研究发现，新城疫病毒介导溶瘤的机制既包括内源通路也包括外源通路。2007年García-Sastre等[3]首次报道了应用重组NDV 病毒进行癌症治疗的研究。本实验确定新城疫病毒抗肿瘤作用，NDV对荷瘤裸鼠卵巢癌细胞Survivin、Caspase-3表达的影响，研究其对卵巢癌细胞的生长抑制作用。结果表明NDV 对卵巢癌细胞有抑制作用，NDV具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，与国外文献报道相符合[4]。
Caspase-3是Caspase家族核心蛋白酶，是凋亡关键酶。大多数细胞凋亡依赖于Caspase-3。当Caspase的活性受抑制引起细胞凋亡与增殖动态平衡失调，就引起多种肿瘤的发生、发展。NDV诱导肿瘤细胞凋亡是Caspase-3依赖的凋亡途径杀伤肿瘤细胞。实验HE染色光镜下见大量坏死区，癌细胞周边见凋亡细胞，细胞缩小、变圆，细胞核染色质致密、固缩，聚集于核膜下，说明NDV 可有效抑制肿瘤细胞生长。免疫组化Caspase-3在鼠移植瘤内几乎呈阴性表达，NDV注射后Caspase-3明显呈阳性表达，提示NDV诱导细胞凋亡与Caspase-3的激活明显相关。NDV能够明显促进细胞凋亡抑制瘤细胞生长，有明显抑瘤作用。细胞凋亡(apoptosis) 是控制细胞生存与死亡的关键机制。Survivin 是凋亡抑制蛋白(IAP) 家族成员之一。Survivin阳性染色主要定位于细胞浆，也可见细胞核着色，呈棕黄色。研究表明Survivin可通过多种调控机制发挥其强大的抗凋亡作用、促进细胞增殖；Survivin抗凋亡机制之一是通过抑制Caspase-3活性发挥抗凋亡作用。Survivin与Caspase-3结合抑制Caspases 的活性， 阻断细胞的凋亡过程，促进肿瘤细胞增生。
本实验证实卵巢癌皮下移植瘤Survivin表达为强阳性，而注射NDV组棕黄染色明显弱于注射生理盐水组，表明Survivin可能阻断细胞凋亡过程，促进了卵巢癌细胞不断增殖；Survivin可能直接作用于Caspase-3并抑制其活性，导致肿瘤细胞凋亡减少而抑制凋亡作用增强，肿瘤细胞过度增生。注射NDV后Caspase-3表达增加而Survivin表达减弱，提示NDV诱导的细胞凋亡可能激活Caspase-3的凋亡活性而抑制Survivin的抗凋亡过程。本实验NDV瘤内注射诱导凋亡抑制瘤细胞生长，调动机体抗肿瘤的免疫功能，NDV为治疗卵巢癌提供新思路。
NDV通过激活Caspase-3凋亡作用，抑制Survivin抗调亡，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制其生长。新城疫病毒(NDV)有可能成为卵巢癌生物治疗的有效药物，Survivin、Caspase-3可能成为疗效指标之一。
[参考文献]
[1] Mayo MA ......
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