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编号:12161159
不同梅毒血清学诊断方法的临床检测与效果评价(2)
http://www.100md.com 2011年8月25日 吴颖 胡瑜洁 孙爱华
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     3 讨论

    梅毒血清学试验有非Tp抗原试验和Tp抗原试验两大类,非Tp抗原试验常见的前者如RPR及甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等,常用于梅毒患者筛查和疗效监测,由于采用心磷脂作抗原、特异性较差,故有RA等少数疾病患者可出现RPR检测假阳性[3]。Tp抗原试验特异性高,但是需制备大量Tp抗原。目前Tp人工培养物主要依赖于Nichols株接种兔睾丸传代和繁殖,产量很低,生产成本高[2]。利用基因工程手段合成重组蛋白具有Tp人工培养物相同的抗原性,不仅缩短获得抗原的时间,且极大降低了生产成本。

    TpN15、TpN17、TpN37、TpN44.5和TpN47被认为是最有临床应用前景的梅毒螺旋体外膜蛋白抗原,利用生物工程获得上述外膜蛋白的重组蛋白作包被抗原建立的ELISAs检测血清抗体方法已有不少研究报道,但多为单一外膜蛋白为基础建立的ELISAs,单一重组抗原灵敏度和特异性较低[3,4]。也有少量实验室建立二个或多个外膜蛋白通过多次包被增加方法的敏感性,由于多个抗原需各自表达与提纯不仅增加了制备费用也可能造成更多的误差,不利于方法标准化和推广应用[4-6]。

    本研究中,我们梅毒螺旋体主要外膜蛋白TpN15、TpN17和TpN47通过生物工程手段构建的融合抗原TpN15-17-47为包被抗原,建立检测梅毒血清抗体的ELISA检测临床确诊梅毒患者血清标本。由于同时具备三个主要抗原,提高了方法的敏感性,检测结果也表明建立的rTpN15-17-47-ELISA方法检测梅毒血清标本与确诊试验TPPA无显著性差异,显著高于目前临床常用筛选试验RPR,同时建立的融合抗原TpN15-17-47可以保证多个抗原一次表达,能有限降低检测成本。rTpN15-17-47-ELISA有望成为快速、廉价、敏感性和特异性较高的梅毒患者血清学筛查方法。

    [参考文献]

    [1] Workowski KA,Berman SM. Sexually transmitted diseases treatment guidelines[J]. MMWR Recomm Rep,2006,55(36):997-1002.

    [2] Morse SA. Advances in diagnostic tests for bacterial STDs[J]. Salud Publica Mex,2003,45(Suppl5):S698-708.

    [3] Farhi D,Dupin N. Serological diagnosis of syphilis[J]. Przegl Epidemiol,2009,63(4):519-523.

    [4] 孙爱华,范兴丽,毛亚飞,等. 梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较[J]. 浙江大学学报医学版,2008,37(1):67-72.

    [5] 杨建兰,郎亦波. 不同血清学诊断方法检测梅毒螺旋体的结果分析[J]. 临床和实验医学杂志,2009,8(5):90-91.

    [6] 沈洪远,余伟,吴敏霞. 三种梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用价值分析[J]. 临床和实验医学杂志,2008, 7(1):53-54.

    (收稿日期:2011-06-27)

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