温州地区婴幼儿HCMV感染现状的分析及其临床意义(2)
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人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)属于β疱疹病毒亚科，有严格的种属特异性，人是其唯一宿主。HCMV感染在人群中极为常见，其血清IgG抗体阳性率因社会经济状态、生活条件和卫生习惯而异。在发达国家高社会经济地位的人群，HCMV抗体阳性率达到40%～80%，而在发展中国家或者低收入人群抗体阳性率甚至达到90%～100%。在免疫力正常的人群，HCMV感染一般不会引起严重的临床表现，而在免疫力低下人群可以引起较为严重的预后。婴幼儿是一个免疫系统不很完善的群体，容易受到HCMV的感染，并表现出一些临床症状。本研究通过化学发光法(CLIA)定量分析900例我院门诊儿童血液样本中HCMV的IgM、IgG抗体以及IgM阳性患者的尿液标本进行HCMV的DNA检测，以了解该群体的HCMV感染状态，为HCMV感染的预防和治疗提供依据。
1资料与方法
1.1一般资料
收集本院2009年5月～2011年5月住院的0～3岁患者900例，根据年龄分为新生儿组(0～28d)、婴儿组(28d～1岁)和幼儿组(1～3岁)。
1.2方法
采集静脉血并分离血清，于-20℃保存，一周内以化学发光法(CLIA)定量检测血清中HCMV-IgM和HCMV-IgG抗体。方法参照雅培化学发光试剂盒，同时设置空白及阴性对照。对HCMV-IgM抗体阳性者采集尿液标本，以FQ-PCR法检测其HCMV病毒核酸载量。具体方法如下：取晨尿1mL于无菌离心管中，2000rpm离心5min，弃上清，沉淀中加入50μL的DNA提取液，混匀，100℃煮沸10min，取出12000rpm离心5min，取上清5μL HCMV DNA扩增体系，扩增条件为93℃2min预变性，93℃ 5s，57℃ 45s，40个循环，37℃ 1s。在Light Cycler自动荧光PCR仪上进行反应，每次实验按照试剂盒提供的定量阳性标准品做标准曲线，同时设置阴性、空白对照。反应结束后，用电脑自动分析计算定量结果。
1.3统计学分析
采用SPSS18.0统计软件进行统计学分析，率的比较采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
全部900例研究对象中，HCMV-IgM和HCMV-IgG均阳性者为148例，占16.4%，HCMV-IgM阳性而HCMV-IgG阴性者为13例，占1.4%；HCMV-IgM阴性而HCMV-IgG阳性者为590例，占65.6%；HCMV-IgM及HCMV-IgG均阴性者为73例，占8.1%。161例HCMV-IgM阳性病例中，59例检测出HCMV-DNA，占36.7%，其中101例出现了肺炎、支气管炎等症状的呼吸系统疾病，占62.7%；有32例出现了肝胆损伤，占19.9%；其余出现了如胃肠道功能紊乱症状、粒细胞减少和血小板减少等血液系统疾病等症状，占17.4%。详见表1～3。
表1各年龄组HCMV感染阳性率比较[n(%)]
年龄组nHCMV-IgM & IgGHCMV-IgG HCMV-IgMHCMV-DNA
新生儿组 223 28(12.5) 189(84.7) 1(0.4) 17(7.6)
婴儿组 511 102(19.9) 305(55.4) 7(1.3) 57(11.2)
1～3岁组 166 18(10.8) 96(57.8) 5(3.0) 2(1.2)
总计 900 148(16.4) 590(65.6) 13(1.4) 76(8.4)
注：HCMV-IgM>5为阳性，HCMV-IgG>15为阳性，HCMV-DNA>5.0E+02为阳性
表2HCMV IgM、DNA阳性患者的临床表现
临床表现例数
肺炎及毛细支气管炎 92
上呼吸道感染9
婴儿肝炎 23
婴儿高胆红素血症 11
胃肠道功能紊乱9
血液系统疾病17
表3 HCMV IgM、 DNA关联性分析
项目DNA(+)DNA(-) 合计
IgM(+) 59102161
IgM(-) 17 646663
经过两两四格表χ2检验，新生儿组与婴儿组的HCMV-IgM阳性率以及HCMV-DNA的阳性率之间有显著性差异(P均<0.05)，且婴儿组的HCMV-IgM阳性率和HCMV-DNA阳性率高于新生儿组；婴儿组与1～3岁幼儿组的HCMV-IgM及HCMV-DNA阳性率之间有显著性差异(P均<0 ......
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