HSP60对小鼠树突状细胞迁移动脉粥样斑块的影响(1)
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[摘要] 目的 探讨热休克蛋白60(HSP60)对ApoE-/-小鼠树突状细胞(DC)迁移至血管动脉粥样斑块中的作用。方法 体外分离ApoE-/-小鼠骨髓细胞，加入rmGM-CSF和rmIL-4使之定向分化为骨髓源性DC，再分别将DC分三组与HSP60、LPS、生理盐水(NS)孵育12h后收集DC。采用流式细胞仪检测各组DC表面的CD80、MHCⅡ的表达率；体外应用Transwell法观察DC迁移能力，小鼠体内腹腔注射后观察DC向动脉粥样斑块迁移能力。结果 与NS组相比，HSP60组与LPS组两组DC表面CD80、MHCⅡ表达水平升高(P<0.05)，体外迁移能力及体内迁移能力提高(P<0.05)。结论 HSP60可以促进DC成熟、提高DC向动脉粥样斑块定向迁移的能力。
[关键词] 热休克蛋白60；树突状细胞；动脉粥样斑块；迁移
[中图分类号] R392 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2011)34-06-02
Effect of Heat Shock Protein 60 on the Migration of Murine Dendritic Cell to Atherosclerotic Plaque
ZHENG Dingyi1 ZHOU Sanjun2
1.Qiaotouhu Health Center of Ninghai County in Zhejiang Province，Ninghai 315600，China； 2.The Third Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310005，China
[Abstract] Objective To investigate the effect of heat shock protein 60(HSP60) on the migration of dendritic cells(DCs) from apolipoprotein E(apoE)-/- mice to atherosclerotic plaque. Methods Myeloid monocytes of the mice were extracted in vitro from mouse marrow， differentiated to DC by rmGM-CSF and rmIL-4，then incubated by HSP60，LPS and NS to 12h，corresponding the variation of phenotype；CD80，MHCⅡ in DCs were detected with flow cytometric analysis；Migration ability was determined by transwell system in vitro and the migration to atherosclerotic plaque in vivo. Results Comparing with the NS-loaded DCs，expresive levels of CD80，MHCⅡ in DCs were higher in HSP60 and LPS groups(P<0.05)；Migration abilities of DCs in vitro and in vivo were higher in HSP60 and LPS groups(P<0.05). Conclusion HSP60 can progress the maturation of mDCs and promote DC migration ability to atherosclerotic plaque.
[Key words] Heat shock protein 60；Dendritic cells；Atherosclerotic plaque；Migration
动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的发生和发展是一种慢性炎症免疫反应密切相关的病理过程。动物实验及临床研究证实AS斑块中存在多种免疫细胞，包括T细胞、巨噬细胞、树突状细胞(dendritic cell，DC)及泡沫细胞等。DC作为已知的体内最强专职抗原提呈细胞(APC)能有效地刺激初始T细胞对异体及自身抗原产生免疫应答，在免疫反应中起着枢纽作用[1]。近来许多临床及动物实验证明，DC聚集在粥样斑块的局部且处于成熟状态[2]。已知有多种抗原可以激活DC，如：LPS、ox-LDL、HSP60、OVA等，其中HSP60作为高度保守的物质，在许多微生物感染中存在，可以诱导DC向感染部位迁移[3]，而也有研究指出HSP60在粥样斑块中富集，故HSP60是否能定向诱导DC向粥样斑块迁移引起人们关切，因而本研究分别从体外和体内来了解HSP60对DC迁移至粥样斑块的能力的影响。
1 材料与方法
1.1 主要试剂和实验动物
10周龄近交载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠购自北京维通利华实验动物有限公司 ......
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