1.5 自动化亮视野双色原位杂交(BDISH)

    BDISH利用缺口平移方法制备二硝基苯基(DNP)标记的HER2 DNA探针和DNP标记的CEP17核苷酸探针。HER2和CEP17信号检测分别由乙酸银、对苯二酚和H2O2与辣根过氧化物酶(HRP)反应，坚固红和奈酚磷酸盐与碱性磷酸酶(AP)反应完成。在同一细胞中同时出现HER2(黑色金属银)和CEP17(红色)的原位杂交信号。结果判读需要计算HER2/CEP17比值，标准依据ASCO/CAP指南中HER2基因扩增计量方法。研究结果显示BDISH和FISH检测结果具有高度一致性[13]，BDISH可以观察组织形态的同时分析两种DNA靶序列，将来可能会替代手工操作的双色FISH技术。目前有学者在尝试建立一种新方法，将BDISH和免疫组织化学相结合，同时检测HER2基因扩增和HER2蛋白过表达，以使进一步提高HER2检测的准确性[14]。

    1.6 银增强原位杂交(SISH)

    该方法是通过使用先进的银沉淀技术，利用酶促反应促进银离子沉积，使金属银直接凝固到靶位点，从而对基因拷贝数有更准确的定量，能够得到非常精确的色素信号。最近的一项研究显示，采用快速SISH检测230例乳腺癌样本的HER2状态，结果与FISH检测具有很高的一致性(99.6%)[14]。SISH需要计算HER2/CEP17比值，标准依据ASCO/CAP指南中HER2基因扩增计量方法 ......