甲型副伤寒杆菌ompX基因原核表达及表达产物免疫原性鉴定
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范兴丽 沈香娣 孙爱华 浙江医学高等专科学校基础医学部;
【摘要】目的构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompX的原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpX免疫原性。方法采用PCR从甲型副伤寒杆菌标准株50001扩增目的基因并构建其原核表达系统,IPTG诱导表达目的蛋白,提取并纯化表达产物。采用免疫扩散法和Western blot鉴定其免疫原性。结果成功构建了ompX的原核表达系统,rOmpX表达量约为细菌总蛋白的28%。rOmpX免疫家兔可产生抗体并能与重组蛋白rOmpX产生阳性Western blot杂交信号。结论成功构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompX的原核表达系统,rOmpX具有良好的免疫原性,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原之一。
【关键词】 甲型副伤寒杆菌 ompX基因 原核表达 免疫原性
【基金】浙江省医药卫生科学研究基金(2011KYB006)
【分类号】R392.7
甲型副伤寒是一种甲型副伤寒沙门菌感染引起的急性全身性感染[1,2]。近年来,由于甲型副伤寒沙门菌临床耐药株以及多重耐药株的出现,致使甲型副伤寒暴发流行[3]。因此,甲型副伤寒已成为中国在内的发展中国家危害人民群众健康的严重传染病之一[1-3]。曾用灭活疫苗阻断甲型副伤
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[摘要] 目的 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompX的原核表达系统，确定其重组表达产物rOmpX免疫原性。 方法 采用PCR从甲型副伤寒杆菌标准株50001扩增目的基因并构建其原核表达系统，IPTG诱导表达目的蛋白，提取并纯化表达产物。采用免疫扩散法和Western blot鉴定其免疫原性。 结果 成功构建了ompX的原核表达系统，rOmpX表达量约为细菌总蛋白的28%。rOmpX免疫家兔可产生抗体并能与重组蛋白rOmpX产生阳性Western blot杂交信号。 结论 成功构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompX的原核表达系统，rOmpX具有良好的免疫原性，可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原之一。
[关键词] 甲型副伤寒杆菌；ompX基因；原核表达；免疫原性
[中图分类号] R392.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2012)34-0004-02
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