基底细胞样型乳腺癌病理形态特征、免疫表型与分子病理检测的相关性(1)
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[摘要] 目的 观察基底细胞样乳腺癌(basal-like breast carcinoma，BLBC)的病理形态特征，探讨基底细胞样乳腺癌的免疫表型特点并与之分子检测的相关性。 方法 对177例BLBC进行形态学观察及免疫组化EGFR、CK5/6检测，再从中挑选10例进行荧光原位杂交(FISH)检测。 结果 BLBC是一组组织形态上呈巢片状排列、无腺管形成、大多为推进性边缘、地图样坏死、核分裂象活跃的、组织学几乎均为Ⅲ级、免疫表型ER、PR及C-erbB-2阴性、EGFR和/或CK5/6阳性的乳腺癌；有EGFR基因扩增的患者其淋巴结转移率更高(P < 0.05)。 结论 BLBC是近年来比较热点的一种新的乳腺癌亚型，具有独特的组织形态特点、免疫组化特征及分子生物学特点，已越来越得到人们的重视和深度认识。
[关键词] 乳腺癌；基底细胞样；免疫表型；分子病理
[中图分类号] R737.9 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2012)36-0112-03
乳腺癌是一种高度异质性的肿瘤，其发病率有逐年上升的趋势，而且无论组织形态、免疫表型、分子生物学特征还是治疗上都有非常大的差异，因此了解这些差异可以对患者实施更有针对性的治疗。当今国际病理学专家提倡根据cDNA组织芯片基因表型将乳腺癌分为五种亚型：腔A型(Luminal A)、腔B型(Lumina B)、正常乳腺样型(normal breast-like)、HER-2过表达型(HER-2 overexpressing)、基底细胞样型(basal-like)，它们具有独立的生物学行为和临床预后[1，2]。BLBC是具有不良临床预后的一种乳腺癌的独立亚型，我们应用免疫组化方法筛选出177例BLBC，探讨其病理形态特征、免疫表型与分子病理检测，为乳腺癌的临床诊断与治疗提供线索。
1 资料与方法
1.1 临床资料
收集本院2010年7月～2012年6月病理诊断为浸润性乳腺癌手术标本1101例。乳腺BLBC的诊断标准为：ER、PR、HER2阴性，EGFR和/或CK5/6阳性。根据此标准，我们在1 101例乳腺浸润性癌中筛选出BLBC 177例。组织经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片，HE染色。
1.2 观察指标
组织学分级、肿瘤的结构特征及细胞特征、生长方式、核分裂像及淋巴结转移情况。
1.3 免疫组化及结果判定
采用SP法，一抗为鼠抗人单克隆抗体，包括CK5/6、EGFR，抗体及SP试剂盒均购自福建迈新生物科技有限公司，具体操作步骤按照说明书。CK5/6、EGFR呈胞膜和(或)浆染色，按阳性细胞百分数分为4级：-，+，2+，3+。
1.4 FISH方法及结果判定
采用荧光原位杂交法，EGFR基因检测试剂盒购自广州安必平医药科技有限公司，具体操作步骤按照说明书。桔红色为EGFR，绿色为CEP7，两种比值均大于2∶1，提示EGFR基因有扩增。
1.5 统计学处理
采用SPSS17.0软件进行统计学分析， P < 0.05表示差异有统计学意义，P < 0.01表示差异有高度统计学意义。
2 结果
2.1临床资料
1 101例浸润性乳腺癌均为女性，其中筛选出BLBC 177例(16.1%)，年龄24～88岁，平均49.3岁，其中76例(42.9%)有淋巴结转移。
2.2 病理形态特征
BLBC呈实性巢片状排列，无腺管形成，大多为推进性边缘，地图样坏死，周围有较少纤维结缔组织分隔，多数肿瘤周围有大量淋巴细胞浸润；肿瘤细胞通常呈合体状，境界不清，胞浆不丰富，核圆形或卵圆形，核染色质粗，核仁易见，核分裂象活跃、组织学几乎均为Ⅲ级。
2.3 EGFR、CK5/6的表达分析
177例BLBC中，EGFR阳性表达135例，见图1；CK5/6阳性表达136例；EGFR、CK5/6的阳性表达率分别为76.3%(135/177)、76.8%(136/177)。
2.4 EGFR扩增情况与淋巴结转移的相关性分析
177例BLBC中76例有区域淋巴结的转移，区域淋巴结转移率为42.9%；177例BLBC中挑选10例行荧光原位杂交检测EGFR扩增情况，发现4例(40%)有EGFR基因扩增，见图2；有EGFR基因扩增的患者其淋巴结转移率更高(P < 0.05)，见表1。
2.5 EGFR表达与其扩增情况的相关性分析
从177例BLBC中挑选10例进行EGFR的FISH检测 ......
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