脐带间充质干细胞无血清培养的实验研究
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2013年9月25日
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李兰兰 马炬明 陈玲肖 浙江中医药大学第二临床医学院;
【摘要】目的建立一种简单的体外无血清培养扩增人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)的方法。方法利用酶消化法分离hUCMSCs,在无血清干细胞培养体系下培养扩增,进行形态学观察,CCK-8法分析细胞生长曲线,流式细胞仪分析细胞表面抗原表达及细胞周期,进行成骨、成脂诱导分化。结果 hUCMSCs呈典型的成纤维细胞形态,具有较强的增殖能力。CD29、CD44、CD90、CD105均呈阳性表达,而CD34、CD45呈阴性表达。3周可诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论利用酶消化法和无血清的培养体系能够快速分离培养出大量hUCMSCs,该方法扩增得到的间充质细胞具备稳定的细胞标记物和生长状态,可用于各种治疗的临床试验。
【关键词】 间充质干细胞 脐带 无血清培养液 细胞培养
【基金】浙江省年度重大科技专项计划项目(2011C13029-1)
【分类号】R329
hUCMSCs因来源丰富、体外扩增能力强、免疫原性低、无伦理问题等受到干细胞研究者的重视。无血清培养基因组分较明确,减少了异种血清临床应用的潜在危险。本实验应用无血清培养体系分离培养hUCMSCs,解决其临床应用的生物安全性问题。1材料与方法1.1实验材料间充质干细胞无血清
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