大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定(2)
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2 结果
2.1 BMSCs的形态学观察
刚接种时细胞悬浮于培养液中，呈圆形，大小不一，折光性较强。48 h首次换液后可见大量细胞贴壁，形态不一，部分伸出伪足。三四天贴壁细胞数量增多，细胞伪足增长呈短梭形。五六天细胞增殖迅速呈克隆样生长的集落。八九天左右细胞形态基本为长梭型细胞，纵轴相互平行排列，一般可达到80%的细胞融合状态。传代细胞接种4 h后基本完全贴壁，很快铺展。细胞增殖速度较原代快，呈均匀分布的纺锤形，五六天即可传代，见图1。
图1 P3 BMSCs培养5 d，×100
2.2 BMSCs的生长曲线
接种后，BMSCs经过1～2 d的潜伏适应期后进入对数增殖期，第7天达顶点，随后进入平台期(平均细胞计数依次为2、2.22、2.44、3.33、5.67、7、8.22、8.11×104/孔)，生长曲线呈S形，符合正常细胞的生长特性，见图2。
2.3 细胞生长周期
流式细胞仪检测结果显示，第3代BMSCs中G0/G1期细胞为86.02%，G2期细胞为5.41%，S期细胞为4.90%，见图3。
图3 P3 BMSCs细胞周期
2.4 BMSCs表面标记物的表达
流式细胞仪检测结果显示，细胞CD44、CD90阳性率分别为96.2%、97.9%，CD34、CD45阳性率分别为0.3%、0.9%，验证此细胞为BMSCs，纯度较高，见图4。
2.5 诱导分化鉴定
成脂诱导后细胞逐渐由梭形变为圆形 ......
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