凋亡调控因子Survivin、XIAP、c—Jun及NF—κB在卵巢上皮性肿瘤中表达的意义(2)
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1.2 方法
采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)，对卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤、卵巢癌中凋亡调控因子XIAP、转录因子AP-1(c-Jun)、NF-κB的表达进行检测。方法：烤片，68℃，20 min；常规二甲苯进行脱蜡，酒精梯度脱水；灭活其内源性过氧化物酶；抗原修复；滴加适当稀释浓度的一抗：XIAP/Survivin(1∶300)和AP-1(c-Jun)(1∶50)，NF-κB p65(1∶200)，滴加生物素标记二抗，37℃孵育半小时，PBS冲洗3次，每次5 min；滴加链霉素卵白素工作液(辣根过氧化物酶标记)，37℃孵育30 min，PBS冲洗3次，每次5 min；DAB/H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，用苏木素进行复染，常规脱水，透明，干燥，封片。
1.3 结果判读
首先要确定免疫组化技术是否合格，合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色，而阳性标志物清晰和定位明确，细胞呈棕黄色着色，阳性信号应与被测抗原所在的部位一致。按细胞染色强度分：弱阳性(+)，阳性细胞数<10%，淡黄色显色或仅个别细胞呈黄至棕黄色；强阳性(+++)，即阳性细胞数>60%以上，多数细胞呈黄色至棕黄色染色；中度阳性(++)，阳性细胞数及显色程度介于弱阳性与强阳性之间。阴性染色结果是组织内预期特定区域中未见抗原表达[2]。
1.4 统计学方法
采用SPSS13.0统计学软件，各组间阳性表达率比较采用χ2检验，各指标表达相关性采用相关性分析，P < 0 ......
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